冠心病患者中HDL的相关酶Lp-PLA2活性水平变化及HDL对肝SRBI受体表达的影响.pdf

目 录 中文摘要 I 英文摘要V 常用缩写词中英文对照表IX 前 言 1 1 实验材料2 1.1 实验动物和细胞株 2 1.2 药物及抗体 2 1.3 实验仪器 3 1.4 主要溶液配制 4 1.4.1 HDL 分离与提取所需试剂4 1.4.2 细胞培养主要溶液配制4 1.4.3 Western blot 主要溶液配制 5 2 研究对象5 3 标本采集6 4 实验方法6 4.1 酶联免疫吸附法测定人HDL 相关酶——人脂蛋白磷脂酶A2 （Lp-PLA2 ） 6 4.2 HDL 提取、分离7 4.3 HDL 浓度的测定及纯度评价8 4.3.1 HDL 测定试剂盒检测 HDL 的浓度 8 4.3.2 SDS电泳初步评价HDL 纯度 9 4.4 ApoE-/-小鼠及肝癌细胞培养及处理 10 4.4.1 ApoE-/-小鼠分组 10 4.4.2 肝癌细胞分组 11 4.5 油红 O 染色肝组织及肝癌细胞 12 4.6 小鼠肝脏组织及肝癌细胞蛋白的提取 12 4.6.1 小鼠肝脏组织蛋白提取步骤 12 4.6.2 肝癌细胞总蛋白提取 13 4.7 Western blotting 检测肝脏及肝癌细胞中 SRBI 蛋白表达 13 5 结 果 14 5.1 正常对照组与冠心病组一般资料比较 14 5.2 冠心病按 Lp-PLA2 四分法分组基本临床资料的比较 15 5.3 Lp-PLA2 与 gensini 评分的相关性分析 16 5.4 冠心病患者危险因素的 logistic 回归分析 16 5.5 重度冠脉病变患者危险因素的 logistic 回归分析 17 5.6 Lp-PLA 2 诊断重度冠脉病变效率的预测价值 17 5.7 HDL 的鉴定 18 5.8 在体动物实验 18 5.8.1 油红 O 染色观察肝组织脂肪积聚情况 18 5.8.2 SRBI 在注射不同来源 HDL 后的小鼠肝脏中表达 19 5.9 离体细胞实验 20 5.9.1 油红 O 染色观察肝癌细胞脂质积聚情况20 5.9.2 肝癌细胞 SRBI 的表达21 6 讨 论22 7 结 论25 参考文献26 综 述28 致 谢37 个人简介39 山西医科大学硕士学位论文 冠心病患者中 HDL 的相关酶 Lp-PLA 2 活性水平变化及与 其对肝 SRBI 受体表达的影响 中文摘要 目的： 本研究分为两大部分，第一部分为临床研究，通过检测冠心病患者中高密度 脂蛋白相关磷脂酶 A2 （Lp-PLA ）水平与冠脉病变程度、HDL 水平的相关性分 析，研究冠状动脉病变程度是否与 HDL 相关酶 Lp-PLA 水平相关，为 Lp-PLA 水平是否通过影响HDL 功能以及其在冠心病冠脉病变严重程度评估方面提供理 论基础。第二部分实验研究，提取冠心病患者及同期健康组的HDL 培养肝细胞 以及将其静脉注入成年小鼠体内，观察健康及冠心病患者HDL 对肝脏中的高密 度脂蛋白受体——B 族I 型清道夫受体（SRBI ）表达的影响，以探讨冠心病患者 高密度脂蛋白对胆固醇特异性摄取的影响，为冠心病患者功能失调HDL 的作用 机制提供理论基础。研究失功能HDL 在小鼠肝脏的作用，并探讨对SR-BI 表达 的影响，为失功能高密度胆固醇的作用机制提