M1_M2型巨噬细胞在大鼠骨骼肌损伤时间推断中的应用.pdf

目 录 摘 要 I Abstract II 常用缩写词中英文对照表IV 前 言 1 1 材料和方法 3 1.1 实验材料 3 1.2 实验方法4 1.3 统计学方法 6 2 结 果 7 2.1 骨骼肌大体及HE 染色观察 7 2.2 骨骼肌挫伤后细胞形态学变化规律 7 2.3 骨骼肌损伤后巨噬细胞表达规律 11 2.4 骨骼肌损伤后M1/M2 型巨噬细胞表达规律 14 3 讨 论 18 3.1 利用形态学指标鉴别损伤区域 19 3.2 巨噬细胞在骨骼肌损伤修复中的“双刃剑”功能 20 3.3 骨骼肌损伤后M1/M2 型巨噬细胞的时序性表达规律 21 4 结论 23 参考文献 24 综述 27 1.骨骼肌挫伤后炎症反应规律 27 2.骨骼肌挫伤后巨噬细胞参与炎症反应和损伤修复规律 28 3. 巨噬细胞标记物的筛选 29 4.损伤时间推断的研究进展 30 参考文献 32 致谢 36 个人简介 37 4 山西医科大学硕士学位论文 M1/M2 型巨噬细胞在大鼠骨骼肌损伤时间推断中的应用 摘 要 目的： 研究大鼠骨骼肌挫伤后细胞形态的变化规律，对损伤区域进行鉴别，根据损伤后 M1/M2 型巨噬细胞的动态变化及浸润趋势建立损伤时间推断方法。 方法： 建立大鼠右后肢骨骼肌挫伤模型，设立对照组和实验组，实验组包括挫伤后6h、 12h、1d、1.5d、2d、2.5d、3d、4d、6d、9d、14d 组，采用HE 染色方法观察各时间 点骨骼肌的损伤、修复规律，运用全景组织细胞定量分析系统检测损伤区内单位面积 肌细胞数量及横截面积变化，肌细胞形态变化(周长，圆润度)，细胞核数量变化等。 用免疫荧光多重染色方法检测各组大鼠骨骼肌组织内MI 及M2 型巨噬细胞数量变化 规律。统计分析损伤组与对照组差异，根据细胞形态学指标鉴别损伤区域。分析M1/M2 型巨噬细胞在损伤区动态表达数量比率，建立与损伤时间的关系。 结果：大鼠骨骼肌挫伤后在0.5mm ×0.5mm 范围内肌纤维圆润度小于0.73±0.16 ， 肌细胞核数量大于 165.8±28.3 个/0.25mm2 时，可以认为该区域为损伤区域。在0.5mm ×0.5mm 范围内，M 1 型巨噬细胞比率在0.05±0.02~0.18±0.12 且M2 型巨噬细胞比率 在0.02±0.01~0.04±0.02 范围内时，推断该组织的损伤时间为伤后6h-2d ；M 1 型巨噬 细胞比率0.22±0.02 且M2 型巨噬细胞比率在0.09±0.02 范围内时，推断该组织的损伤 时间为损伤后2.5d ；M 1 型巨噬细胞比率0.1±0.02 且M2 型巨噬细胞比率在0.16±0.07 范围内时，推断该组织的损伤时间为损伤后 6d ；M 1 型巨噬细胞比率 0.05±0.01~0.09±0.02 且M2 型巨噬细胞比率在0.07±0.02~0.09±0.01 范围内时，推断该 组织的损伤时间为损伤后9-14d 。 结论： 大鼠骨骼肌挫伤后，部分肌细胞形态学特征可用于损伤区域的识别，M 1/M2 型 巨噬细胞随时间变化表达规律可作为损伤时间推断的新依据，进一步提高损伤时间推 断的准确性。 关键词：法医病理学；损伤区域识别；损伤时间推断；巨噬细胞；免疫荧光多重染色 I 山西医科大学硕士学位论文 Application of M1 / M2 macrophages in estimating the time of