酶活计算（2020年-2021年）.pdfVIP

比活：每毫克酶蛋白所具有的酶活力。单位是 u/mg 。比活越高则酶越纯。 酶活单位一般都是自己定义的， 或是根据行业标准、 国家标准定义， 一般定义成在适宜的温 度 PH下，每分钟 ( 或每小时 ) 催化生成 1 克 ( 或 1 毫克，或 1 毫摩尔，等等 ) 产物的酶量。 酶的比活力 1、在特定条件下，单位重量（ mg）蛋白质或 RNA所具有的 酶活力单位 数。 2、 比活力 ( 性 )(Specific Activity) 是酶纯度的量度 , 即指 : 单位重量 的蛋白质中所具有酶的活力单位数 , 一般用 IU/mg 蛋白质来表示 . 一 般来说 , 酶的比活力越高 , 酶越纯 . 。 3、比活力 为每毫克蛋白质所具有的酶活力单位数，一般用酶活力单 位 /mg 蛋白质表示。酶的比活力在酶学研究中用来衡量酶的纯度，对于同一 种酶来说，比活力越大，酶的纯度越高。利用比活力的大小可以用来比较 酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力，是表示酶的纯度高低的一个重要指 标。 酶活力 ( 酶活性 ) ，就是指：酶催化底物化学反应的能力。因此，测定酶活力，实 际上就是测定酶促反应进行的速度，酶促反应速度越快，酶活力就越大；反之， 速 度越慢，酶活力就越小。 二、酶活力单位 酶活力单位是衡量酶活力大小的计量单位。历史上，对于酶活力单位的规定， 没有统一的标准。 对于不同的酶或者同一种酶， 由于测定方法的不同， 对酶活力 的 单位，常常有不同的规定。例如：蛋白酶的活力单位，规定为： 1min 内，将酪 蛋白 水解，产生 1 μg 酪氨酸所需要的酶量，定为一个单位 ( 1U=1μg 酪氨酸／ min) ； 淀粉酶 的活力单位，规定为：每小时催化 1g 可溶性淀粉液化所需要的酶量，定为一个 单位 (1U=1g 淀粉／ h) ；或者，每小时催化 1ml 2 ％可溶性淀粉液化所需要的酶量，定 为一 个单位 (1U=1×2 ％ 淀粉／ 1h) 。 为了统一酶活力单位的计算标准， 1961 年，国际生物化学协会酶学委员会对酶 活力单位作了下列规定：在指定的反应条件下， 1min 内，将 1 微摩尔 ( /4m01) 的底物 转化为产物所需要的酶量，定为一个国际单位 (1U=1 mol/min) 。如果底物分子有 一个 以上可被作用的化学键， 则一个酶活力单位， 便是 1min 使 1 μmol 有关基团转化， 所 需要的酶量。上述反应条件是： 25℃，最适 pH，饱和底物浓度。 由于种种原因，上述国际单位未被广泛采用，目前，在许多场合下，仍然采用 上述习惯算法。 为了使酶活力单位与国际单位制中的反应速度 (mol/s) 相一致， 1972 年，国际酶 学委员会正式推荐用 Kat(Katal) 作为酶活力单位。 规定为： 在最适条件下， 每秒 钟内， 能使 1mol 底物转化成产物所需要的酶量，定为一个 Kat 单位 (1Kat ＝1mol/s) 。 Kat 与 国际单位 (u) 的互算关系如下： 7 1Kat=6 ×10 U 1U=16.7nKat 三、比活力 比活力 ( 比活性 ) 是指：每毫克蛋白质中所具有的酶活力 ( 活力单位数 ) 。 比活力 =酶活力 ( 活力单位数 )/ 蛋白质含量 (mg) 有时，亦用每克酶制剂含有的活力单位数来表示。 酶制剂的酶含量及纯度常用比活力的大小表示。比活力较大的酶制剂，其酶含 量及纯度较高。 在酶分离提纯过程中，每完成一个关键的实验步骤，都需要测定酶的总活力和 比活力， 以监视酶的去向。 判断分离提纯方法的优劣和提纯效果，