《生物化学》教学课件：RNA2013part2.pptVIP

四膜虫rRNA内含子的二级结构 四膜虫rRNA的剪接采用自我剪接方式 5′-端核苷酸序列 G OH 3′ G 5′ OH 5′ 3′ G OH 414 G 399 5′ 3′ 395 5′ 3′ E1 E2 I 四膜虫RNA的自我剪接 5′ 3′ L19RNA 具有催化活性的片段 最简单的核酶二级结构——槌头状结构 (hammerhead structure) 底物部分 通常为60个核苷酸左右 同一分子上包括有催化部份和底物部份 催化部份和底物部份组成锤头结构 除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。 核酶研究的意义 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 4. 模板理论(piecing theory) 一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。 五 真核RNA聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅲ启动转录与聚合酶Ⅱ基本相似 RNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ 也有各自特异的通用转录因子，识别各自特异的DNA调控元件。 聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅲ启动转录不需ATP，而聚合酶Ⅱ则需要水解ATP。 * 1. 真核生物RNA聚合酶Ⅰ启动的转录 ——rRNA RNA-pol Ⅰ识别的转录控制区两个： 人rRNA基因上游调控元件和核心元件 +1 -100 rRNA前基因 上游调控元件 核心元件 转录区 * 有两种DNA结合蛋白能使聚合酶Ⅰ准确地启动rRNA前体分子基因的转录，一种叫上游结合因子(upstream binding factor,UBF), UBF先与DNA结合，结合的部位是UCE和核心元件的上游部分，再由另一种叫选择性因子1 (selectivity factor 1, SL1)结合，然后由聚合酶Ⅰ结合，并启动转录。SL1的一个亚基就是上面提到的TBP。 * * ２.真核生物RNA聚合酶Ⅲ启动的转录 　　　——tRNA, 5S-rRNA RNA-pol Ⅲ识别的启动子位于被转录的序 列之中，称为内启动子 (internal promoter)。 tRNA基因 tRNA基因的内部启动子 A box B box 5S-rRNA 5S-rRNA基因的内部启动子 C box * boxA boxB TF ⅢC TF ⅢC TF ⅢB Pol Ⅲ 酿酒酵母(S.cerevisiae)的RNA聚合酶III启动的转录 tRNA基因转录起始时，先由TFⅢC与A盒和B盒结合，然后TFⅢC和TFⅢB结合，后者再结合到转录起始点上游约30bp处，RNA聚合酶Ⅲ启动转录。 5SrRNA基因转录起始时，先由另一个被称为TFⅢA的蛋白因子与C盒结合，然后TFⅢC与TFⅢA结合，再由TFⅢB与TFⅢC结合，RNA聚合酶Ⅲ启动转录 。 boxA boxc TF ⅢA TF ⅢA TF ⅢC TF ⅢB Pol Ⅲ 起点 起点 5S-rRNA基因转录 tRNA基因转录 真核生物RNA的加工 Post-transcriptional Modification 第四节 一、真核生物mRNA的转录后加工 （一）首、尾的修饰 5?端形成 帽子结构(m7GpppGp —) 3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 帽子结构 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG ppi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 帽子结构的生成 5? ppGp… 磷酸酶 Pi （二）mRNA的剪接 1. hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) snRNA (small nuclear RNA) 核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 （并接体, splicesome） snRNA 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 2. 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰