【临床血液学-实验课课件】_实验四 POXandPAS.pptVIP

* 提供演示文稿的简要概述。 介绍演示文稿的重点及其重要的原因。 逐一介绍主要主题。 为了使观众了解演示文稿， 您可以 在整个演示文稿过程中重复此概述幻灯片，突出显示下一个您将讨论的特定主题。 * 实验三 过氧化物酶染色（POX） 过碘酸-雪夫反应（PAS） 细胞化学染色Cytochemical Staining 实质是原位显示细胞成分结构，常为不移 动的有机化学物。 细胞化学染色包括三个步骤： 过氧化物酶染色Peroxidase Staining （POX） 1.原理： 传统方法----联苯胺法 过氧化氢 过氧化物酶 新生态氧 联苯胺 联苯胺蓝 亚硝基铁氰化钠 稳定的蓝色化合物 然后 10分钟 操作步骤 新鲜涂片 滴加A液3滴（覆盖标本即可） 滴加等量B液3滴,吹匀 水洗，甩干 甩干，镜检 滴加C液3滴，D液6滴混匀 5分钟 注意事项 （1）标本要新鲜 （2）试剂要室温，用后要盖好，防止挥发 （3）加试剂要充分混匀，使染色均匀 结果判断（100×） 胞浆中出现红棕色至蓝黑色颗粒为阳性反应 （—）无颗粒沉着 （弱+） 颗粒细小，分布稀疏 （+）颗粒较粗常呈局灶性分布 （++）颗粒粗大分布较密占胞浆1/2~2/3 （+++）颗粒粗大，呈团块状分布 （++++）颗粒布满细胞，可覆盖胞核 正常参考值 正常人淋巴细胞、红细胞、巨核细胞、成熟嗜 碱性粒细胞，均无POX； 粒细胞系统：早幼粒以下阶段细胞均为阳性，且逐渐加强，嗜酸粒细胞阳性最强 单核细胞内POX呈弱阳性。 临床意义1.辅助鉴别急性白血病的类型 急性粒细胞白血病 AML （+） 急性淋巴细胞白血病 ALL（-）(阳性率3％) 急性单核细胞白血病 AMOL（-/±） 2. 辅助鉴别急性早幼粒细胞白血病（APL)、急性 单核细胞白血病（AMOL)、恶性组织细胞病（MH) A: APL B: AMML C: AMOL D: ALL 过碘酸是一种氧化剂，能使细胞内含有乙二醇的糖类氧化产生双醛基，醛基与schiff试剂中的品红结合，形成紫红色化合物，定位于含有多糖成分的部位。 Periodic Acid-Schiff (PAS) reaction 过碘酸－雪夫反应（糖原染色) 操作步骤 涂片滴加A液3滴固定60秒 （DW冲洗，待干） 滴加B液（高碘酸）3滴氧化10 min， DW冲洗，待干 滴加C液（雪夫染液） 3滴氧化15 min， DW冲洗 待干 滴加D液（甲绿） 3滴复染5分钟 镜检 DW冲洗 待干 结果 阳性反应：胞质内染红色或紫红色，呈弥 散状、颗粒或块状。胞核染成绿色。 PAS反应 沉淀颗粒特点 粒系统 （+） 细颗粒状或均匀红色 淋巴系统 少数（+）（20％） 粗颗粒状或块状 单核系统 （+） 细颗粒状 红系 （-） 巨核系 （+） 颗粒状或块状 正常血细胞PAS染色特点 ?临床意义 1.鉴别淋巴系统增生的性质 恶性增生时多呈强阳性---ALL、CLL、淋巴瘤（红色颗粒或块状） 2.鉴别红系增生的性质 红血病、红白血病为强阳性 地中海贫血、IDA 、MDS为阳性 巨幼细胞性贫血、HA 、AA 阴性 3. 急粒大多数阴性/少数阳性（均匀分布颗粒） 4. 巨核系（血小板）阳性，有助于M7的诊断 5. Gaucher 细胞 (+)，Niemman-pick 细胞 (-/±) 注意事项： 1.试剂要在室温 2.雪夫试剂及时使用 3.结果及时观察，放置1周褪色 * 提供演示文稿的简要概述。 介绍演示文稿的重点及其重要的原因。 逐一介绍主要主题。 为了使观众了解演示文稿， 您可以 在整个演示文稿过程中重复此概述幻灯片，突出显示下一个您将讨论的特定主题。 *