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巨噬细胞吞噬实验 一、实验目的 观察巨噬细胞的大吞噬现象，了解吞噬试验操作方法。 二、实验原理 巨噬细胞可非特异吞噬较大的颗位性异物如鸡红细胞、白色念珠菌等，称为大吞噬现象。本试验将鸡红细胞注入小鼠腹腔中，腹腔巨噬细胞可吞噬和消化鸡红细胞，一段时间后取巨噬细胞观察吞噬现象并计算其吞噬百分率和吞噬指数，作为判定其吞噬活性的指标。小鼠腹腔腹腔注射 淀粉，可使腹腔中有较多的巨噬细胞，以供观察吞噬活动。 三、实验材料 1. l%鸡红细胞悬液：取肝素抗凝鸡血lml与生理盐水99ml混匀。 2. 6%可溶性淀粉肉汤：肉汤培养基 100ml加入可溶性淀粉6g，经煮沸灭菌30min。 3.小白鼠1只。 4.瑞氏染液、手术剪刀、镊子、显微镜等。 四、实验步骤 实验前一天取小白鼠腹腔注射6％淀粉。 1．小鼠腹腔注射5％的鸡红细胞悬液1-2ml，轻揉腹部使鸡细胞分散。 2. 40~60分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。 3. 剪开腹腔，用吸管吸取腹腔液，滴在载玻片上，推片，显微镜下（油镜）观察。 五、结果 鸡红细胞是有细胞核的，镜下巨噬细胞的细胞核和鸡红细胞核均染成蓝色，巨噬细胞的胞浆呈浅红色。记数 100个巨噬细胞，计算吞噬百分率和吞噬指数。 吞噬百分率＝100个巨噬细胞中内含鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞总数 吞噬指数＝100个巨噬细胞吞噬的鸡红细胞总数/100个巨噬细胞总数 注意事项 1. 染色时间不宜过长30s-1min; 2. 水洗时间不宜过长, 否则细胞易破损. * * 单核巨噬细胞吞噬过程示意图 巨噬细胞吞噬细菌（电镜） 肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌（电镜） 瑞氏染色观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞 1000 x * *
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