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- 2020-10-21 发布于广东
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五、蛋白质的呈色反应 一、双缩脲反应: 含有多个肽键的蛋白质和肽在碱性溶液中加热可与Cu离子作用生成紫红色内络盐。 可用于蛋白质、多肽的定量测定。 氨基酸无此反应,可用于检查蛋白质的水解程度。 * 双缩脲反应 紫红色络合物 (碱性溶液) Cu2+ * 五、蛋白质的呈色反应 二、茚三酮反应 三、Folin—酚试剂反应 * 练习 六、简答题 1、何谓蛋白质的变性? 2、影响变性的理化因素有哪些?请举例说明。 * 内容总结: 蛋白质的理化性质 两性解离(电泳) 胶体性质(透析、离心) 变性、复性、沉淀、凝固 紫外吸收 呈色反应(双缩脲、茚三酮 Folin-酚) 2.蛋白质的等电点(pI) 当蛋白质溶液处于某一 pH 时,蛋白质解离 成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子, 净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电 点。 * * 练习 下列哪种蛋白质在pH5.0的溶液中带负电荷? A.pI为5.5的蛋白质 B.pI为4.0的蛋白质C.pI为7.0的蛋白质 D.pI为5.0的蛋白质 * 体内大多数蛋白质的等电点在pH5.0 左右, 因而在生理条件下以阴离子形式存在 。 * 3.电泳 定义: 带电粒子在电场中向电性相反的电极移动的现象。 蛋白质在带电场中泳动的速度和方向与其所 带电荷的性质、数量及分子的大小、形状有关。 带电荷多,分子小的泳动速度较快;反之则泳动 较慢,从而达到分离蛋白质的目的。 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白 分为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白 、γ球蛋白。 * * A:染色后显示的蛋白质区带 B:光密度扫描定量分析 * * * 正常 肝硬化 * * 二、蛋白质的胶体性质 1.蛋白质有胶体性质 蛋白质是生物大分子,分子量在1万~10万kD(千道尔顿)之间,分子直径在胶体颗粒的范围(1—100nm) 因此,蛋白质具有胶体的性质。 * 2.蛋白质亲水胶体稳定的因素 蛋白质分子表面的水化膜和同种电荷。 去掉两个稳定因素,则蛋白质从溶液中析出而产生沉淀。 * * 练习 盐析法分离蛋白质的原理是: A.破坏蛋白质的一级结构 B.破坏水化膜及中和电荷 C.破坏蛋白质的二级结构 D.使蛋白质变性沉淀 * 3.蛋白质胶体性质的应用 透析: 用于分离纯化蛋白质 超速离心: 用于蛋白质的分离纯化及分子量的测定。 * * 沉降系数(sedimentation coefficient,S) 指单位力场中的沉降速度 沉降系数与物质的分子量的大小、形状、密度及溶剂的密度高低有关。 分子量越大,颗粒越紧密,沉降系数越大。 *
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