动物微生物 任务二 细菌的人工培养 项目一 细菌 情境二 细菌生理及培养技术 任务二 细菌人工培养.pptVIP

 任务二 细菌的人工培养 一、培养基： 定义：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物质。 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素。 任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理。常规高压蒸汽灭菌：1.05kg/cm2, 121.3℃，15-30分钟。 培养基类型： 按其用途分类：基础培养基、 营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基等。 按其物理状态分类：固体培养基、液体培养基、半固体培养基。 厌氧培养基 基础培养基 营养培养基 选择培养基 鉴别培养基 1.基础培养基——含多数细菌生长繁殖所需的基本营养成分，也是配制特殊培养基的基础。 例： 肉汤蛋白胨培养基:加入脱纤维兔血或羊血—分离、培养某些病原微生物，提供一些辅酶或血红素等特殊生长因子。 蛋白胨水培养基:加入葡萄糖或蔗糖—糖发酵培养基，用于鉴定某些肠道菌。 2.增菌培养基—— 根据目的菌的生理特性，在培养基中加入某些促进其生长繁殖、抑制杂菌生长的营养物质，以提高目的菌检出率。 例： 四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）、煌绿增菌培养基等是常用的肠道增菌培养基. 3.选择培养基——在培养基中加入对非目的的微生物有抑制作用，而对目的菌无影响的物质，以有利于目的菌的检出。 其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。 例： 麦康凯琼脂平板可抑制球菌及革兰氏阳性杆菌的生长，有利于肠道菌生长，称弱选择培养基； SS琼脂培养基加入了胆盐等抑制剂，对沙门氏等肠道菌无抑制作用，但可抑制肠道非治病菌生长，称强选择性培养基。 选择培养基应用实例—水样品中各种微生物的计数 滤膜在不同的培养基上培养的结果 A、用于全微生物计数的标准培养基； B、用于粪便大肠菌计数；粪便大肠菌在其上形成蓝色菌； C、用于大肠杆菌计数的m-Endo培养基；大肠杆菌在其上形成绿色菌落； D、用于酵母和霉菌计数的Wort培养基。 4.鉴别培养基——培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的其它菌落相区别的培养基。 例： 糖发酵培养基 常用染料： 碱性染料：苏木精、亚甲蓝、碱性品红 （碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷） 酸性染料：伊红、坚牢绿、橙黄G （酸性染料电离时，其分子的染色部分带负电荷） 细菌细胞通常带负电荷，应该用何种染料染色？ 大肠杆菌显色培养基 用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌的快速检测。大肠杆菌显蓝绿色，大肠菌群显无色，其它菌显黄色或无色，革兰氏阳性菌被抑制。 金黄色葡萄球菌在BP琼脂上典型特征 典型的金黄色葡萄球菌为灰黑色菌落，其外围有一不透明圈 鉴 别 培 养 基 5.厌氧培养基——专供厌氧菌的分离、培养和鉴别。 常用：庖肉培养基 基础液体培养基 石蜡 普通肉渣 + 庖肉培养基 按物理状态不同划分 固体培养基 液体培养基 在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为1.5%-2.0% 琼脂含量一般为0.3%-0.5% 不加任何凝固剂 半固体培养基 固体培养基常用来进行微生物的分离纯化、增菌、鉴定、活菌计数及菌种保藏 观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价测定 （动力检测，保种） 大量繁殖细菌，大规模工业生产及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的研究 液体培养基 固体斜面培养基 半固体培养基 固体平板培养基 二、细菌的培养方法 分离培养：划线接种在固体培养基的表面，因划线的分散作用，使许多原混杂的细菌在固体培养基表面上散开。 纯培养：挑取一个菌落，移种到另一培养基中，可生长出来的大量的纯种细菌。 发酵培养：在适宜的条件下，发酵罐中大量培养微生物（细菌、真菌等）细胞和生产代谢产物的工艺过程。 纯培养 (pure culture) 液体 培养基 斜面 培养基 菌落(colony) 菌落 纯培养 斜面培养基 液体培养基 菌种筛选 摇瓶试验 发酵罐中试验 发酵生产 发酵培养——由实验室研究到产业化的过程 细菌的生长温度 细菌类型 生长温度℃ 分 布 最 低 最 适 最 高 嗜冷菌 -5～0 10～20 25～30 水和冷藏环境中的细菌 嗜温菌 10～20 18～28 40～45 腐生菌 10～20 37 40～45 寄生菌 嗜热菌 25～45 50～60 70～85 温泉及堆积肥中的细菌 4、气体：主要指氧和二氧化碳。 细菌与人类不同，并非所有细菌的生长都需要氧气，根据对氧的需要，可把细菌分为四类： 专性需氧菌：具有完善的呼吸系统，需要氧分子作为受氢体以完成需氧呼吸，必须在有氧的环境下生长繁殖，如结核杆菌； 微需氧菌：在低氧分压(5%～