免疫比浊法检测免疫球蛋白[实用].pptVIP

透射比浊法的缺陷： (1)溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大，分子太小则阻挡不了光线的通过。 (2)溶液中的抗原－抗体复合物的数量要足够多。如果数量太小，溶液浊度变化太小，对光通量影响不大。 (3) 透射比浊是依据透射光减弱的原理来定量的，因此只能测定抗原－抗体反应的第二阶段，检测仍需抗原－抗体温育反应时间，检测时间较长。 光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面的光能数量 * 精品PPT·可编辑借鉴 原理 散射比浊法 在入射光的一定角度检测粒子发出的散射光，散射光的强度与IC的含量呈正比。 * 精品PPT·可编辑借鉴 散射比浊法测定原理 增 加 散 透 率 : 660nm 测 定 散 射 光 聚集形成 诱导剂 * 精品PPT·可编辑借鉴 散射光测定 检测器 (LED) 光电计 样品 100 % 0 % 时间 散射光强度 * 精品PPT·可编辑借鉴 速率散射比浊法 （一）基本原理 — 是测定抗原抗体结合反应的动态过程。 — 所谓速率，是在单位时间内抗原抗体结合形成 复合物的速度。将各单位时间内形成复合物的 速率及测定的散射信号连接在一起，即是动态 的速率比浊分析。 — 当仪器测定到某一时 间内形成速率下降时， 即出现速率峰，该峰 值的高低，即代表所 测抗原的量。 * 精品PPT·可编辑借鉴 CONCENTRATION RATE 在速率峰基础上完成的标准曲线 * 精品PPT·可编辑借鉴 方法评价： 敏感度高 快速(不必达平衡） 抗原抗体结合的动态测定，理论上测定不受本底散射信号的影响 可检测微量样品 * 精品PPT·可编辑借鉴 原理 2.终点散射比浊法 让抗原抗体作用一定时间，使其反应达到平衡后，测定其IC形成的量。IC的浊度不再受时间的影响，但反应IC聚合产生絮状沉淀之前，进行浊度测定。 * 精品PPT·可编辑借鉴 散射比浊法的缺陷 (1)因为是一次性测定光吸收值，没有考虑每一个待测样本的吸收和散射效果，可测定结果不准确 (2)测定的仍是抗原－抗体反应的第二阶段，不适合快速检测。 (3) 终点法存在反应本底，测定样本的含量越低本底比例越大，故在微量测定时，本底的干扰是影响准确测定的重要因素。 * 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * 精品PPT·可编辑借鉴 精品PPT·可编辑借鉴 * Chromogenic assays are based on the specificity of their chromogenic substrate and the resulting color development from the reaction. So the chromogenic measurement principle requires a detection of speed of color change and a quantitation of this reaction (colorimetric). With the advanced in optical and electronic technology, very small change in optical density (milli-absorbance) can now be measured extremely accurately. Combining this with chromogenic substrate specificity, chromogenic assay means sensitivity and improved precision for many parameters which could not be assayed satisfactory before using the traditional clotting method. For the Sysmex CA-1500 a single halogen lamp is used and via a filter an incident beam of light at 405 nm is generated and split into four beams by fiber optic for the four channe