分子生物学-15-3-第八章真核基因表达调控-4-表观调控.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 第8章 真核基因表达调控 课程教案 授课题目：表观调控 教学时数： 2 授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 真核基因表达调控的活性染色质的变化（理解） 甲基化、乙酰化（掌握） 活性染色质结构 教学重点： 重点阐明：活性染色质结构 重点指出：DNA甲基化与基因表达抑制的关系。 本节重点指明活性染色质的结构上的调控 教学难点： 绝对难点：活性染色质活化的机制、特征 相对难点：无 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 表观遗传（epigenetics） ? 是指DNA序列不发生变化，但基因表达却发生了可遗传的改变。 ? 这种改变是细胞内除了遗传信息以外的其他可遗传物质发生的改变， ? 这种改变在发育和细胞增殖过程中能稳定传递。 ? 基因型不发生改变，但是表型会发生改变 表观遗传学的现象 ? DNA甲基化 DNA甲基化(Methylation of DNA） 为DNA化学修饰的一种形式， 能够在不改变DNA序列的前提下， 改变遗传表现。 ? 基因组印记（genomic impriting） 由不同性别的亲本传给子代的同源染色体中的一条染色体上的基因因甲基化修饰引起不同表型的现象 ? RNA编辑（RNA editing） ? 基因沉默 ? 核仁显性 ? 休眠转座子激活 ? RNA干扰(RNA interference） 是指由反义RNA诱发的基因沉默现象。 ? 组蛋白质修饰(Protein Modification）： 透过改变蛋白结构，而引致蛋白质产生不同的作用和特性，例如：疯牛症蛋白异变。 ? 组蛋白质修饰(Histone Acetylation）的染色质改型 染色体透过组蛋白修饰等改变结构，减少或增加基因与蛋白质接触，从而控制基因表现。 小结：DNA的甲基化与基因活性的调控 组蛋白的乙酰化与基因活性的调控 组蛋白的甲基化与基因活性的调控 这些表观修饰通常是通过已经存在的修饰标记招募其他的修饰酶到某特定的染色质区域而实现。相互之间存在互作和整合作用。 8.3.2 DNA甲基化与调控 1、DNA的甲基化位点 2.DNA甲基化的生化机制 通过酶催化作用，以S-腺苷甲硫氨酸SAM为甲基供体将甲基转移到胞嘧啶第5位碳原子上 真核生物细胞内存在两种甲基化酶活性： 日常型甲基转移酶:主要在甲基化母链也就是模板链指导下使处于半甲基化状态的DNA双链分子上与甲基胞嘧啶对应的胞嘧啶甲基化 从头合成型甲基转移酶：不需要模板链指导，可以使未甲基化的链发生甲基化，速度很慢 3、DNA甲基化抑制基因转录的机理 DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。基因活性状态越高，甲基化程度越低，正在表达的基因是去甲基化的。 更重要的是DNA的甲基化是与组蛋白的修饰（组蛋白的甲基化、乙酰化）相关的 甲基化后的DNA会使B-DNA转变成Z-DNA，大沟几乎没有了，小沟更深了，沟中的信息不容易被蛋白质识别，造成转录抑制 甲基化后的DNA通常与甲基化CpG结合蛋白（MeCP1，methyl CpG-binding protein 1）结合， MeCP1的结合能力越强，抑制转录的效果越强； 甲基化密度越高，抑制转录的效果越强； 启动子越弱，甲基化后抑制转录的效果越强； 如果这个启动子上游或者下游含有增强子，则增强子可以削弱甲基化的抑制作用 4、DNA甲基化与X染色体失活page322 ? 雌性胎生哺乳类动物细胞中两条X染色体之一在发育早期随机失活，以确保其与只有一条X染色体的雄性个体内X染色体基因的剂量相同。 一旦发生X染色体失活，使该细胞有丝分裂所产生的后代都保持同一条X染色体失活。 v X染色体失活中心 —— Xic 位点（X-chromosome inactivation center），失活染色体上绝大多数基因处于关闭状态，DNA被高度甲基化。 Xist基因只在失活的X染色体上表达（Xi-specific transcript） ，其产物是一功能性RNA，含有大量的终止密码子，不编码蛋白。 8.3.3 组蛋白乙酰化对基因表达的影响p323 1.组蛋白乙酰化的位点 组蛋白是组成核小体的基本成分， 核小体是组成染色质的基本结构单元。 组蛋白的乙酰化及去乙酰化主要发生在核心