分子生物学-14-1-第八章真核基因表达调控-3-染色质修饰和染色质重建.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 第8章 真核基因表达调控 课程教案 授课题目：染色质修饰和染色质重建 教学时数： 2 授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 真核基因表达调控的活性染色质的变化（理解） 甲基化、乙酰化（掌握） 活性染色质结构 教学重点： 重点阐明：活性染色质结构 重点指出：DNA甲基化与基因表达抑制的关系。 本节重点指明活性染色质的结构上的调控 教学难点： 绝对难点：活性染色质活化的机制、特征 相对难点：无 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 教学内容与教学设计： 教学设计 续上节，先复习上节和上上节的知识，没有什么特殊设计。 教学导入 续上节 开门见山 8.3.1 真核生物DNA水平的调控 基因重复 基因丢失 某些原生动物、线虫、昆虫和甲壳类动物在个体发育中，许多体细胞常常丢失掉整条或部分的染色体 高等真核生物（包括哺乳动物、开花植物） 大部分体细胞中保留着整套的染色体，而生殖细胞中丢失一半的染色体：减数分裂 个别类型体细胞中，哺乳动物成熟的红细胞， 丢失全部染色体 四膜虫： 大核： 营养核 删除约10%的基因组DNA 基因扩增 染色体扩增 基因扩增 编程性扩增 内多倍体现象在动物中（包括人类在内）是相当普遍的 肝细胞中常出现四倍体 家蚊幼虫的肠壁细胞核也存在内多倍体 基因扩增某些基因拷贝数专一性增大的现象，它使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要，是基因活性调控的一种方式 非洲爪蟾卵母细胞中rDNA的基因扩增 黑腹果蝇的发育中，卵壳蛋白基因在基因组中通过复制的重叠环而被扩增 基因重排 将一个基因从远离启动子的地方移到距启动子很近的位点从而启动转录的方式。 通过基因重排调节基因活性的典型例子是免疫球蛋白结构基因的表达 5.开放型活性染色质 1、染色质的两种状态而且能够通过修饰相互转换 2、染色体重建改变了待转录基因的启动子处的核小体的组织形式，便于转录装置与启动子靠近 3、“启动子核小体”可能是控制基因转录的大门 4、组蛋白的修饰影响染色质的结构 5、真核细胞中基因转录的模板是染色质而不是完全裸露的DNA 染色体和染色质是细胞间期中不同阶段的两种存在形态。 呈伸展状态的区段称为常染色质； 呈卷曲凝缩状态的称为异染色质 常染色质是染色质的主要成分， 常染色质的凝缩状态同基因的活性相关联，其凝缩程度很可能支配着基因的活性。 活性表达状态的基因一定处在常染色质中； 但常染色质中的基因并非全处于活性表达状态， 通常只有一小部分基因在进行转录。 1真核生物染色体水平上的基因表达调控 开放型活性染色质结构对转录的影响： 按染色质上基因功能状态的不同可将染色质分为活性染色质和非活性染色质。 活性染色质是指具有转录活性的染色质； 非活性染色质是指没有转录活性的染色质。 2真核生物染色体水平上的基因表达调控 1. 对核酸酶敏感 活化基因常有超敏位点，位于调节蛋白结合位点附近。 2. DNA拓扑结构变化 天然双链DNA均以负性超螺旋构象存在；基因活化后呈正超螺旋 3. DNA碱基修饰变化 真核DNA约有5%的胞嘧啶被甲基化，基因活化后，DNA通常是去甲基化的，而且甲基化范围与基因表达程度呈反比 4. 组蛋白变化 ① 富含Lys组蛋白水平降低 ② H2A, H2B二聚体不稳定性增加 ③ 组蛋白修饰 ④ H3组蛋白巯基暴露 2真核生物染色体水平上的基因表达调控 在结构上： “开放”，疏松 染色质结构较伸展， 核小体组蛋白高度乙酰化， DNA中CpG多为去甲基化； 位于基因5′端启动子区域出现DNaseI超敏感位点， 每个活跃表达的基因都有一个或几个超敏感位点， 典型的特征是染色质结构域的出现： 在功能上： 有利于转录调控因子与顺式调控元件结合， 有利于RNA聚合酶在转录模板上滑动。 活性染色质的开放状态，即核小体构象发生改变， 在功能上： 有利于转录调控因子与顺式调控元件结合， 有利于RNA聚合酶在转录模板上滑动。活性染色质的开放状态，即核小体构象发生改变，典型的特征是染色质功能域的形成。 MAR： matrix-associated region, 核基质相关区域，或核基质结合区， 又称为SAR， scaffold a