生物化学教学课件：08 Protein Degradation and Amino Acid Metabolism(162-5).pptVIP

第八章 蛋白质降解和氨基酸代谢 Protein Degradation and Amino Acid Metabolism 要 求 蛋白质降解机理（掌握） 蛋白质的营养价值与氮平衡（了解） 氨基酸分解代谢（掌握） 脱氨基作用、尿素循环、 氨基酸碳骨架的氧化 氨基酸的合成（理解） 氨基酸衍生物的生物学功能（了解） 主要内容 蛋白质降解 氨基酸分解 尿素循环 糖、脂 三羧酸循环 完全氧化 氨基酸合成 蛋白质合成 第一节 蛋白质降解及氮平衡 本节主要内容 内源蛋白的降解 蛋白质的消化吸收 蛋白质的营养价值与氮平衡 一、内源蛋白的降解 1940年，Henry和Rudolf证明细胞内蛋白质不断更新（turnover）。 蛋白质的降解和合成是动态平衡的，成人每天有1%左右的蛋白被更新。 主要功能：清除异常、损伤和老化的蛋白质 清除过量的酶和调控蛋白 蛋白质的半衰期 t1/2 半衰期差异很大，动物肝脏蛋白的t1/2约1～8天，结缔组织蛋白的t1/2约180天，许多关键性调节酶的t1/2 很短。 大鼠肝脏蛋白质 t1/2（小时） 鸟氨酸脱羧酶 0.2 酪氨酸转氨酶 2.0 乳酸脱氢酶 130 组蛋白 ＞200 1. 溶酶体降解机制（lysosomal mechanism ） 溶酶体内的多种酸性蛋白酶称为组织蛋白酶（cathepsin），在pH 5左右活性最高。 溶酶体融合细胞质中的自体吞噬泡（autophagic vacuol），降解其内容物；还可以与吞噬小体融合，降解胞外蛋白和膜蛋白。 溶酶体途径主要降解外源性蛋白和衰老的细胞器、细胞膜受体（如胰岛素受体、乙酰胆碱受体）。 2.泛肽-蛋白酶体途径（ubiquitin-proteasome) 1980年，以色列科学家阿龙·切哈诺沃和阿夫拉姆·赫什科，美国欧文·罗斯发现了泛肽调节的蛋白质降解途径。 共同获得2004年诺贝尔化学奖 泛肽（或泛素） 76个氨基酸组成，普遍存在于真核细胞内，一级结构高度保守，酵母与人相差3个氨基酸。 泛肽与靶蛋白共价结合，使之带上死亡标记，然后被蛋白酶体降解，特异性高。 靶蛋白上的结合位点：Lys-ε-NH2 泛肽结合位点: C末端羧基 泛肽串连-Lys-48 泛肽-蛋白酶体途径 蛋白质降解的化学信号 降解决定子（degron）：决定某一蛋白发生降解或部分降解的一个氨基酸或一段氨基酸序列 E3识别靶蛋白的降解决定子，调节靶蛋白的降解 蛋白质降解的化学信号－1 N末端氨基酸 1986年，Varshavsky提出N末端氨基酸决定蛋白质半衰期。 Ser：t1/2 = 20小时 Asp: t1/2 = 3分钟 此外，Phe、Tyr、Trp、Lys、Arg、Leu也是短寿命蛋白的标记。 蛋白质降解的化学信号－2 PEST序列 短寿命蛋白中通常有一段8个氨基酸左右的保守序列，富含Pro、Glu、Ser、Thr。 例如，转录因子Gcn4p的PEST序列位于91～106,正常的半衰期是5 min。如果将此PEST序列切除,半衰期增加到50 min。 蛋白质降解的化学信号－3 个别氨基酸的氧化 Lys、Arg或Pro被Fe2+氧化。例如，大肠杆菌和鼠肝中的谷氨酰胺合成酶。 蛋白质以天然状态存在时，信号被隐藏；当蛋白结构变化，信号暴露而被泛素系统发现并降解。这就是折叠异常、突变或老化蛋白易被降解的原因。 二、蛋白质的消化吸收 哺乳动物消化道中的胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶、氨肽酶和弹性蛋白酶水解食物蛋白，生成的氨基酸在小肠被吸收。 动物消化道蛋白酶 消化道中蛋白质降解与吸收 食物→胃泌素→壁细胞→盐酸 主细胞→胃蛋白酶原→胃蛋白酶 胰蛋白酶原、糜蛋白酶原→胰蛋白酶、糜蛋白酶 羧肽酶、氨肽酶、弹性蛋白酶 小肠粘膜