Transcription of virus genomes 逆病毒复制: mRNA 潜伏 杂种双链 逆病毒复制过程 1 : 1、 进入细胞 ; 2、 反转录 在反转录酶的作用下以病毒 RNA 为模板 合成 DNA ,然后再形成线形 dsDNA; 3、 整 合 DNA 拷贝整合到宿主基因组中; 4、 转 录 病毒 DNA 转录形成病毒 mRNA 和子代病毒 RNA; 5、 壳体化 在细胞质中产生核衣壳; 6、 出 芽 粒子在细胞质膜处以出芽方式放出 . HIV replication 3 HIV2 主要是一种 DNA 聚合酶,表现出三种酶活性: ①以 RNA 为模板合成 DNA( 反转录 ) ; ②以 DNA 为模板合成 DNA; ③ RNA 酶 H 活性 ( 降解 RNA:DNA 杂交链中的 RNA 链 ) ? 反转录酶在进行 DNA 合成时需要的 引物 是特异的细胞内 tRNA . ? 用作引物的 tRNA 的类型依病毒种类而不同,是从以前 的宿主细胞带入病毒粒子的。 如: Rous sarcoma( 肉瘤 ) virus 使用色氨酸 tRNA 。 逆转录酶 reverse transcriptase 从逆转录 v 形成 dsDNA 的步骤 1 从逆转录 v 形成 dsDNA 的步骤 2 逆 转 录 病 毒 的 复 制 +RNA DNA 肿瘤病毒引起细胞转化的模式图 dsDNA 如 SV40 病毒的全部或部分 DNA 整合到宿主细胞 DNA 中; 编码转化信息的病毒基因被转录并被剪切为病毒 mRNA 分子,然后转运到胞浆被翻译成 转化蛋白或 T 抗原 。 T 抗原能使得宿主细胞转变为癌细胞 -RNA 病毒增殖 如:弹状病毒 单纯疱疹病毒复制 dsDNA 5 、病毒的装配、成熟与释放 装配 (assembly) : 亦称 形态发生 (morphogenesis) 新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒 释放 release 成熟的子代病毒颗粒然后依一定途径释放到细胞外 病毒的释放标志病毒复制周期结束 成熟( maturation ) 涉及病毒粒子的结构变化(蛋白构型),抗原差异 T4 噬菌体的装配是一个极 为复杂的自我装配的过程 大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放 丝杆噬菌体(如 M13 或 fd )不杀死细胞,子代毒粒以分泌方式 不断从受染细胞中释放,并 同时完成毒粒的组装 。 5 、病毒的装配、成熟与释放 有 包膜病毒的装配与释放 有时也是同时完成的 有包膜的动物病毒是在从宿主细胞核芽出或细胞 质膜芽出的过程中裹上包膜而形成包膜病毒 TMV 的装配 : RNA 穿过螺旋的中心孔并在生长端形成一个可移动的环。 第三章 病毒的增殖 病毒的特点: 严格细胞内寄生物,只能在活细胞内繁殖 毒粒 宿主细胞 有繁殖性的病毒基因组 具有感染性的毒粒消失 病毒基因组复制、表达 病毒核酸和蛋白质 装配形成具有感染性的毒粒 释放至细胞外 原料 能量 生物合成场所 第三章 病毒的增殖 一、病毒的复制周期 (一)、一步生长曲线 (二)、病毒侵染寄主细胞的过程 二、病毒的异常复制(非增殖性感染) 病毒的增殖方式 —— 复制 replication 病毒感染敏感宿主细胞后,病毒核酸进入细胞,通过其复制与 表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质,然后由这些新合成的 病毒组分装配( assembly )成子代毒粒,并以一定方式释放到 细胞外。 一、病毒的复制周期 复制周期( replicative circle )或称复制循环: 自病毒吸附于细胞开始,到子代病毒从感染细胞 释放到细胞外的病毒复制过程。 第三章 病毒的增殖 用于病毒复制研究的实验系统 噬菌体 —— 细菌培养系统 动物病毒 —— 动物细胞培养系统 植物病毒 —— 动植物原生质体培养系统 ? 易培养、易控制 ? 噬菌斑、易观察 ? 生长快,周期短 一、病毒的复制周期 (一)、一步生长曲线( one step growth curve ) 1939 年, Max Delbruck Emory Ellis : E. coli / bacteriopage 1 、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞 2 、数分钟后,加入抗噬菌体的 抗血清 3 、将上述混合物 大量稀释 4 、保温培养
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