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牛肉膏蛋白胨培养基配方： 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养 基。它含有牛肉膏、蛋白胨和 NaCl 。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白 胨主要提供氮源， 而 NaCl 提供无机盐。 在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。 琼脂在常用浓度下 96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化， 以免琼脂烧焦。琼脂在 40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量 根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。 由于这种培养基多用于 培养细菌（荤食） ，因此，要用稀酸或稀碱将其 pH 调至 中性或微 碱性 ，以利于细菌的生长繁殖。 牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下： 牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、NaCl 5g、琼脂 15— 20g、水 1000ml、pH 7 ．4— 7．6 （7.0— 8.0） 三、器材 牛肉膏，蛋白胨， NaCl ，琼脂； 1mol/L NaOH ， 1mol/L HCl ； 试管，三角烧瓶，烧杯，量筒， 玻棒， 培养基分装器， 扭力天平，牛角匙， 高压蒸汽灭菌锅， pH 试纸（ pH 5 ．5— 9．0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。 四、操作步骤 1．称量 按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、 NaCl 放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑 取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接 放入水中， 这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离， 然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸 潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称 取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。 2．溶化 在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。 待药品完全溶解后， 补充水分到所需的总体积。 如果配制固体培养基， 将称好的琼脂放入已 溶化的药品中， 再加热溶化， 在琼脂溶化的过程中， 需不断搅拌， 以防琼脂糊底使烧杯破裂。 最后补足所失的水分。 3．调 pH 在未调 pH 前，先用精密 pH 试纸测量培养基的原始 pH 值，如果 pH 偏酸，用滴管向培养 基中逐滴加入 1mol/L NaOH ，边加边搅拌， 并随时用 pH 试纸测其 pH 值，直至 pH 达 7 ．6。 反之，则用 1mol/L HCl 进行调节。注意 pH 值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响 培养基内各离子的浓度。 对于有些要求 pH 值较精确的微生物，其 pH 的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有 关说明书）。 4 ．过滤 趁热用滤纸或多层纱布过滤， 以利结果的观察。 一般无特殊要求的情况下， 这一步可以省去 （本实验无需过滤）。 5．分装 按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图Ⅴ -1。 分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。 (1)液体分装分装高度以试管高度的 1/4 左右为宜。 (2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的 1/5 ，灭菌后制成斜面，如图Ⅴ -2 。分装三角烧 瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 (3)半固体分装试管一般以试管高度的 1/3 为宜，灭菌后垂直待凝。 6．加塞 培养基分装完毕后， 在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞， 以阻止外界微生物进入培养基内而 造成污染，并保证有良好的通气性能（棉塞制作方法附本实验后面）。 7．包扎 加塞后， 将全部试管用麻绳捆扎好， 再在棉塞外包一层牛皮纸， 以防止灭菌时冷凝水润湿棉 塞，其外再用一道麻绳扎好