AM-AM-FS-Ac-18034 牛奶中的β-内酰胺抗菌素.docVIP

PAGE PAGE 1 AMAMFSAc18034 牛奶 β-内酰胺抗菌素 亲和力定量测定 AM-AM-FS-Ac-18034 牛奶中的β-内酰胺抗菌素 1.原理概要 在β-内酰胺抗菌素对微生物细胞壁上的某些酶的特有的不可逆的亲和性基础上进行分析。把14C标记的青霉素和芽孢杆菌加到牛奶样品中。样品中的抗菌素与14C青霉素争夺结合位置。计算结合碳-14的量，并与对照物比较来测定β-内酰胺抗菌素的存在。 2.仪器和试剂 2.1 仪器 (a)加热器——恒温，13×100mm玻璃管的干套管加热器。 (b)冷却板——容纳13×100mm管子。 (c)放射性计数管——150或300mm型。 (d)移液管——半自动的。 2.2 试剂 注意:把标样和试剂简便地量入试管，塞住，如果保存超过1天，应在－20℃冷冻。使用时试剂应保持在4℃以下。试验开始时，牛奶应低于15℃。 (a)不含青霉素的牛奶——用水重新组成不含青霉素的全脂奶粉。 (b)14-C青霉素——含103μCi/μmol。每次分析中用0.0027μCi。 (c)牙孢杆菌——每次试验大约用47mg湿重的植物细胞。 (d)青霉素G标样—— (1)零点标样:用不含青霉素的牛奶(a)。(2)0.01 IU/ml标样:把1IU青霉素G钾或钠USP参比标样加到12.5