黑灵芝醇溶性提取物镇痛抗炎作用研究.pdfVIP

摘要 摘 要 炎症是宿主对内源性和外源性刺激产生的一种免疫反应，与很多慢性疾病的 发生有着直接或间接的关联。外周组织损伤所致的炎症既伴随有疼痛的产生(持 续性自发痛、痛敏及触痛等)，同时又有明显的红、肿、热等反应。此外，疼痛 意味着身体已经受到组织损伤或预示即将遭受损伤。疼痛一方面通过神经系统的 调节引起一系列的防御反应，另一方面又是对身体的一种难以忍受的精神折磨， 严重影响学习、工作、饮食和睡眠。最终因生活质量降低而产生不可忽视的经济 和社会问题。然而，炎症及其引起的很多相关疾病尚无特效药治疗。因此，具有 抗炎镇痛功效的天然产物逐渐成为研究热点。黑灵芝是一种天然药(食)用菌，是 一种著名的天然食材，具有抗肿瘤、降血糖、调节免疫功能等多种活性功能。本 文以黑灵芝为原料提取黑灵芝醇溶性活性组分，通过体外细胞培养和体内动物实 验模型，观察黑灵芝醇提物的抗炎和镇痛作用。通过建立动物模型和细胞模型， 采用扭体实验、热板法、福尔马林致痛法观测黑灵芝醇提物镇痛作用；采用醋酸 扭体法、巨噬细胞抗炎实验和白细胞渗出法观察抗炎作用。结果显示： 1.黑灵芝醇提物对小鼠因热刺激所产生的疼痛感具有明显的抑制作用，并且 随着药剂量增加和药物潜伏期的延长，镇痛作用明显。在醋酸扭体实验中，黑灵 芝醇提物对醋酸引起的小鼠扭体反应次数的减少，效果显著，高剂量组抑制效果 最好。福尔马林疼痛测试中，黑灵芝醇提物发挥了类似吗啡的镇痛作用，因此我 们推测黑灵芝醇提物的镇痛作用机制与吗啡相似，且纳洛酮可拮抗黑灵芝醇提物 的镇痛作用，说明其镇痛作用可能是通过阿片受体实现的。 2.黑灵芝醇提物能显著减少白细胞的分泌，对醋酸诱导的小鼠毛细血管通透 性增高有明显的抑制作用。在LPS诱导的炎症细胞模型中，分析发现黑灵芝醇 提物可能通过抑制巨噬细胞分泌NO，达到抗炎作用。数据结果表明黑灵芝醇提 物具有良好的抗炎作用。 3.黑灵芝醇提物可显著降低LPS诱导的巨噬细胞吞噬能力增强，抑制IL-1β 和NO 的生成，促进抑炎细胞因子IL-10 的释放和甘露糖受体 （MR）表达增加， 说明黑灵芝醇提物的抗炎作用机制与MR 表达有关。而随着抗MR 的预处理， LPS MR 黑灵芝醇提物对 诱导的炎症反应抑制作用有所减弱，说明了 对黑灵芝 醇提物抗炎作用的调节作用。 综上所述，本研究证实了黑灵芝醇提物具有抗炎镇痛作用，进一步研究表明 MR 其作用机制可能与巨噬细胞表面的 表达密切相关。 关键词：黑灵芝；醇溶性提取物；炎症反应；镇痛 I 目录 目 录 缩略词VII 第一章 绪论1 1.1 灵芝概述1 1.2 黑灵芝概述1 1.3 黑灵芝的作用与功效2 1.4 镇痛抗炎理论基础2 1.5 国内外相关研究现状3 1.6 研究方法5 1.7 研究内容5 1.7.1 镇痛研究5 1.7.2 抗炎研究6 1.8 研究目的和意义6 1.9 研究主要创新点7 第二章 黑灵芝醇提物的镇痛作用研究8 2.1前言8 2.2 实验仪器和试剂9 2.2.1 主要仪器9 2.2.2 主要试剂9 2.3 实验材料和动物10 2.3.1 实验材料10 2.3.2 实验动物10 2.4 实验方法10 2.4.1 小鼠醋酸扭体实验10 2.4.2 小鼠热板实验11