【国自然】病毒与细胞相互作用导致炎症的基础.docxVIP

项目名称： 病毒与细胞彼此效果导致炎症的根底研讨 首席科学家： 吴建国 武汉大学 起止年限： 2012.1-2016.8 依托部分： 教育部 一、要害科学问题及研讨内容 本项目将以病毒与细胞彼此效果为根底，环绕病毒感染导致宿主细胞炎症展开6个方面的研讨作业。 1、DNA病毒感染导致炎症反响的规则 疱疹病毒感染会在机体内上皮安排、角膜、乃至脑内等部位引发炎症，不同部位引发炎症的效应细胞和炎症介质是了解炎症产生机制的要害。以疱疹病毒为首要研讨方针，发现并承认或许的与DNA病毒感染相关的炎症介质并进一步挑选与疱疹病毒感染相关的炎症细胞特异组分，并以此为根底，承认病毒感染诱发的炎症因子的表达规则。隔阂，炎症的产生需求外源感染生物、机体炎症相关细胞、炎症因子三方面的一起效果，三者有序联络在一起的途径即为引发炎症的胞表里致炎信号通路。将判定信号通路中每一环节的细胞因子，逐个承认病毒组分与细胞炎症因子的配体和受体、胞内炎症信号传输分子的联系，终究承认疱疹病毒引发炎症反响的信号通路和或许的分子机制。由于疱疹病毒感染机体后能构成裂解性感染和潜伏性感染。不同的感染效果构成的炎症反响产生又不同，而不同的感染效果又与病毒相关感染蛋白的彼此效果有关。经过对效果于同一炎症因子或相同促炎信号通路的疱疹病毒编码蛋白进行协同剖析，了解这些有相同致炎效果的不同病毒调控蛋白所产生的调理炎症产生或病毒感染的归纳效应，终究构建一个DNA病毒感染与诱发炎症反响的初级效果网络模型。 2、RNA病毒感染导致炎症反响的规则 以汉坦病毒为首要研讨方针，经过对RNA病毒与宿主彼此效果研讨，侧重提醒RNA病毒核酸及其编码蛋白与炎症信号通路中重要分子的彼此效果机制。在此根底上，进一步剖析病毒组分与细胞组分彼此效果对炎症的产生或消除的影响，清晰影响炎症转归然后导致严峻病理性炎症反响的规则。研讨宿主细胞在RNA病毒感染诱导的炎症反响中对各种炎性细胞向炎症部位和引流淋巴结搬迁的效果，并运用老练的RNA病毒反向遗传学技能，得到重组的流感病毒和水疱性口炎病毒（Vesicular Stommatitis Virus），树立果蝇的微量打针感染模型，结合生物学信息模型猜测候选基因，从事规模性的与炎症信号通路相关的活体遗传挑选，判定新的参加RNA病毒炎症反响的信号分子，研讨其功用和机制，终究承认RNA病毒感染与诱发炎症反响的的规则。 3、非编码RNA调控炎症反响的机制 判定疱疹病毒和汉坦病毒等基因组内的非编码RNA并剖析其发动子的序列特征，讨论病毒非编码RNA在宿主细胞内的表达调控办法。在此根底上，判定病毒非编码RNA靶向的宿主基因，讨论这些基因编码蛋白对炎症反响的调控。隔阂树立病毒非编码RNA致炎的转基因小鼠模型，从全体视点讨论病毒对炎症产生、展开进程的调控。在此根底上，从动物水平上，讨论病毒非编码RNA对炎症相关信号通路的影响以及对促炎因子和血管生成因子的表达调控，深化了解病毒感染导致炎症的分子机制。由于在病毒感染导致细胞炎症信号途径活化的进程中，胞内的miRNA和lncRNA表达关于病毒感染导致炎症的调控具有重要意义。为此，咱们也将研讨胞内miRNA和lncRNA在炎症信号活化进程中表达的改动，研讨它们对RIG-I炎症信号的调控效果和机制。并进一步以炎症因子IL-6和TNF-α活化巨噬细胞为模型研讨细胞表达的非编码RNA对IL-6和TNF-α下流信号传导途径的调控效果。承认非编码RNA调控炎症反响的效果及机制。 4、病毒感染导致炎症反响的生物学效应 深化讨论调控细胞因子风暴产生的宿主因子，尤其是ADE与天然免疫信号通路的彼此效果，发现和判定一系列影响宿主细胞因子风暴产生的编码蛋白及要害位点，清晰其调控细胞因子风暴产生的分子机制，然后说明病毒感染导致炎症反响的生物学效应，并以转录组学和蛋白质组学为根底，讨论病毒与前言、病毒与宿主彼此效果导致前言和宿主在感染病毒前后差异表达的基因，剖析或许触及到炎症构成的因子在DF、DHF和DSS构成进程中的效果，隔阂剖析这些因子在病毒感染细胞后对病毒的信息反馈，剖析这些来源于前言和宿主的数据，寻觅它们的共性，尤其是在病毒感染导致炎症构成方面的共性。依据取得的数据选用反向遗传学手法验证这些因子对疾病构成、病毒在前言中的继续感染和病毒的增殖的影响。 承认流感病毒感染所构成的炎症相关的重要病毒蛋白与核酸及其生物学效应及机制，运用流感病毒体外细胞和小鼠感染模型，对不同亚型流感病毒、流感病毒的重组与点骤变体诱导的炎症反响，细胞因子、炎症相关通路要害分子等进行体系性检测与剖析，讨论流感病毒蛋白以及基因组包含特别的基因成分例如CpG，辨认宿主不同的病原辨认受体的办法，与炎症要害分子的彼此效果机制以及导致各种炎症反响的生物学效应，以期发现病毒炎症相关的蛋白与基因，及其重组与变异