【国自然】家蚕主要经济性状功能基因组与分子改良研究.docxVIP

项目名称： 家蚕首要经济性状功用基因组与分子改进研讨 首席科学家： 夏庆友 西南农业大学 起止年限： 2005.12至2010.11 依托部分： 教育部 重庆市科委 一、研讨内容 1． 拟处理的要害科学问题 针对丝绸工业质量低、效益差、结构对立杰出等要害问题，拟在家蚕基因组信息的根底上，以家蚕重要功用基因的克隆为起点，在科学上要点提醒丝蛋白组成、性别决议、免疫和发育的遗传机制，讨论家蚕产值、质量和抗病性等重要经济性状构成的分子机理；在技能上处理怎么运用基因工程改进家蚕质量，经过遗传调理进步家蚕出产功用问题。拟处理的科学问题的具体内在是：1．1家蚕质量改进的理论根底丝蛋白组成和抗性是两个家蚕首要的出产性状，其改进的理论根底是遗传机制。其间，茧丝是丝绸工业的质料，是职业产值和质量效益的首要决议要素。尽管蚕茧质量和产值性状首要由多基因分配，但其分子根底是丝蛋白的组成。因而，有哪些基因参加了丝蛋白的组成？它们构成了什么样的生化途径？是两个首要处理的问题。其次，要答复首要结构基因（丝素、丝胶和p25基因）的调控范畴结构，相关的调控因子是什么？首要结构基因全序列在不同遗传材猜中的多态性是什么？以及首要基因的蛋白质产品特征是什么等问题，这是讨论茧丝质量和产值构成遗传根底的要害。而抗病性是家蚕另一个首要经济性状，怎么进步家蚕的抗性？其要害在于了解家蚕对病毒、细菌和真菌等首要病原微生物的免疫机制。因为家蚕抗微生物肽是其首要的抗菌分子，因而，在分道扬镳取得了家蚕首要抗菌肽基因的根底上，要点要答复这些基因的具体抗菌功用是什么，经过对不同抗性资料的研讨，答复首要免疫基因与抗性构成的联络是什么等问题，终究了解家蚕抗性性状构成的首要遗传机制。性别决议和发育是家蚕别的两个重要的性状，它们决议工业的结构和效益。性别和发育的改进途径是进行人为的干与和调理，因而研讨的要害是寻觅判定靶基因。关于性别决议而言，其靶基因有必要契合两个根本条件：一是处于调控网络的上游，才干完结彻底的性别调理；二是雌为有功用而雄为无功用办法，才干满意基因干与的需求。这就需求答复家蚕性别决议要害基因是什么和相互联络是什么，在此根底上，要点承认性别网络上游的，雌为有功用办法和雄为无功用办法的特异基因。关于家蚕反常发育而言，触及的基因数量多，克隆也相对简单，可是研讨标明，大多数基因的干与将会构成蛹逝世，或许影响其他发育进程的顺利进行。因而，发育调理靶基因也有必要契合两个根本要求：一是处于调控网络的上游，二是有必要具有严厉的时期特异性。激素和激素受体基因处于整个调控网络的最顶端，是项目要研讨的要点对象。要处理的根本问题是参加蛹到蛾反常的激素和受体基因有哪些，效果办法和特征是什么等。1．2运用功用基因发明新式资料怎么运用功用基因触及两个要害科学问题和两个技能层次。两个要害问题是：一为以与工业密切相关的首要经济性状分子机理研讨为根底，针对现在家蚕种类在产值和质量上的首要缺点，影响结构效益的工业展开的首要约束要素，对家蚕经济性状进行分子改进；二是发明性地运用家蚕蛋白质组成才能，树立丝腺生物反应器，出产高附加值的生物工程和医药产品。要完结上述问题，在技能上分两个层次进行：首要树立转基因家蚕技能，处理常识产权和功率问题；其次是经过对方针基因进行分子改进，处理面向有用种类的遗传资料立异问题。环绕以上要害问题，计划从四个方面展开研讨： 精密图谱构建、图谱整合和基因定位技能研讨为处理基因别离和功用判定的规划和功率问题，在家蚕基因组结构图的根底上，要点展开以下几方面的研讨：经过对现有家蚕基因组序列信息资源的整合，一致拼接拼装，添加序列图谱的掩盖，充沛运用已有EST和全长cDNA资源，完善基因组注释，构建精密图谱；在现在已有表达信息的根底上，研讨要害发育时期和安排的SAGE剖析，树立系统的家蚕基因表达图谱和数据库；构建并整合分子连锁图谱和经典遗传图谱；要点展开依据遗传图谱的基因定位技能研讨，并运用遗传资源（骤变系统）对重要基因进行定位。 重要基因的功用判定与分子机理研讨处理要害基因的功用判定、说明重要经济性状的遗传调控机理是项意图中心。经过基因组序列剖析，咱们分道扬镳开始承认了丝蛋白质结构基因调控范畴和相关物质代谢基因，反常发育进程中的激素和受体基因，与微生物反抗相关的抗菌肽基因和以Fem和Bmdsx为中心的性别信号传导基因等一系列重要的功用基因。要点对上述要害展开以下几方面的研讨： 基因的完好序列和结构（包含全长基因组序列、全长cDNA序列），表达特征，基因结构多态性，调控办法和调理因子，对重要性状的影响和在基因互作网络中的方位和效果，小分子mRNA、小肽功用，病原体（如NPV）与宿主细胞相互效果分子机理研讨，遗传调理（低表达或基因敲除，超表达或许功用取得）的生物学效应，在转基因家蚕中的运用根底