【国自然】力学刺激对植体-骨界面骨系细胞mRNA表达的影响.docxVIP

力学影响对植体-骨界面骨系细胞mRNA表达的影响 Effects of the mRNA expression in implant-bone interface bone cells after mechanical stimulate 摘要 在树立力学影响骨系细胞的动物试验模型的根底上，使用激光捕获显微别离技能（LCM）, 获取动物模型体内栽培体—骨界面区域的成骨细胞和破骨细胞,用基因芯片法检测不同力值的接连力学影响效果下基因表达谱的时序改动。清晰从骨构成到骨损坏这个质的改动进程中，基因表达的差异和相关的特异性基因，讨论成骨细胞和破骨细胞的耦联机制，从体系视点研讨生理负荷促进骨构成和超负荷导致骨损坏的基因调控机制的差异，测验筛选出与骨构成和骨损坏相关基因，以为骨生物力学及骨安排工程学供给理论依据，并进一步完善负荷状态下骨安排与人工资料界面骨改建机制的理论，为临床确诊和防治供给理论先导。 （一）立项依据与研讨内容 1、项意图立项依据（附首要的参阅文献目录）。 跟着医学科学的开展，一些人工栽培体或设备越来越多的被植入骨安排，用于医治病变和修正残缺，如人工关节、牙栽培体，以及骨内固定设备等。抱负的人工栽培体或设备应以与骨安排紧密结合(骨整合Osseointegration)的办法行使其生理功用, 可是，仍有部分植入体不能到达或坚持长时刻的骨整合，导致植入体松动、掉落和并发症的发生，除了植入体资料自身的要素之外，负荷后骨安排的应力改动也是重要的影响要素之一，且已引起许多学者的重视。因为植入体与骨安排之间一直存在一个界面，负载后界面骨安排的应力应变与正常骨安排负载后的应力应变不同，这种力学环境的改动，或许会促进骨安排与人工资料的界面发生习惯性改建，到达抱负的骨整合；也或许会导致骨安排与人工资料的界面发生骨吸收。骨吸收会使栽培体与骨安排别离，添加了植入物微粒、细菌及炎症介质等侵入的时机，引起炎症反响，加快骨吸收并构成植入体松动，然后影响栽培体的生计率和生计时刻。因而，了解力学影响对骨安排与人工资料界面骨改建的影响，将有助于解说临床调查到的现象，有助于与骨生物力学相关的诸学科的开展，如骨折固定、人工关节置换、牵张成骨、口腔栽培修正、口腔正畸、骨质疏松症的防治及骨安排工程研讨等等。 机械影响发生的耦合力传递到骨安排，使骨系细胞发生应力应变效果，这些改动经过多个信号转导通路的转导，导致骨系细胞发生多种生物学效应并完结骨的改建。成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC)是骨改建的两大首要功用细胞，在应力、生长因子、激素等效果下两者之间彼此效果，彼此调控，使骨发生习惯性地构建。其间由应力应变构成细胞的生物学反响和改动，引起了人们的重视[1]，大都学者以为[2]：不同的力学影响能够导致成骨细胞、破骨细胞活性和数量的改动，影响骨构成与骨吸收，而这显着是因为骨系细胞基因表达和基因调控发生改动的效果。现在的研讨依据标明： 1、体外培育成骨细胞加载研讨证明[3-5]：成骨细胞未受力时, 前期立刻基因c-fos、c-jun在细胞中止期内不表达；受力学影响后初期即显着添加，其表达一般与细胞的增殖分解隔阂呈现，因而其转录翻译蛋白或许对其它晚应对的基因转录起调控效果。Ikegame等[6]发现：加载6h后，骨构成蛋白-4（BMP-4）基因表达添加，成骨特异性转录因子cbfa1/Osf-2也跟着BMP-4基因表达开端表达。Pavlin等[7]发现：加载24h后，成骨细胞中骨钙蛋白水平轻度下降，但在加载1-2d，其表达添加了4.6倍，到第4d则添加了7倍，到达其添加的最高峰；I型胶原基因的表达在加载后第1d不显着，但在第2d其表达添加了3倍，并在这今后6d保持这一水平。Cillo等[8]则针对别的一些重要的基因表达进行了研讨：试验中发现拉伸应力能够使TGF-β和胰岛素样生长因子-II的mRNA表达添加，碱性成纤维细胞生长因子表达削减，且不同的力值和加载时刻对这些基因的表达有不同的影响。显着成骨细胞受力后，基因的表达在必定的时刻规模内存在显着的时序性改动。 2、破骨细胞是骨吸收的首要功用细胞，传统以为破骨细胞是一个“慵懒细胞”，对力学影响不灵敏，首要是经过成骨细胞感触力学影响今后，经过耦联机制影响破骨细胞的活性、增殖和搬迁。可是最近的研讨标明[9]：应力可直接导致体外培育的破骨细胞mRNA表达的增强，并伴跟着骨吸收能力的增强。 3、大都试验是树立在对OB、OC静态加载的根底上，但动态载荷对骨改建的影响远大于静态载荷，已得到许多学者证明，即间歇性的周期性力学影响对细胞的增殖分解功用和基因表达的效果显着大于持续性静态负荷的效果[10-11]。但其原因和机理尚不清楚。 4、对力学信号转导的研讨标明[12--14]：骨系细胞外表的离子通道在细胞膜遭到力学效果数秒或数分钟后即可引起G蛋