中药化学技术_薄层色谱技术_吸附薄层色谱技术.ppt

吸附薄层色谱技术 任务导入 如何用薄层色谱法检测中药中含有的化学成分？ ? 1.定义：是将固体吸附剂均匀铺在玻璃板上形成薄层，把欲分离的样品点在薄层上，用适宜的溶剂作为流动相展开，使混合物得以分离的液-固色谱操作技术。 2.基本原理：利用吸附剂对混合物中各成分吸附能力的不同，以及展开剂对各成分解吸附能力的不同，使各成分实现分离。 吸附色谱 组成 吸附剂 被分离成分 展开剂 3.色谱组成 极性吸附剂—硅胶、氧化铝（应用最广泛）； 聚酰胺 非极性吸附剂—活性炭 （1）硅胶：表面具有硅醇基，微显酸性，能与许多化合物形成氢键，吸附能力较氧化铝稍弱。 适合于中性或酸性成分（包括非极性和极性较小的化合物）分离，但不宜直接用于分离碱性物质。 吸附剂 分类 硅胶结构示意图 极性吸附剂—硅胶、氧化铝（应用最广泛）； 聚酰胺 非极性吸附剂—活性炭 （1）硅胶：表面具有硅醇基，微显酸性，能与许多化合物形成氢键，吸附能力较氧化铝稍弱。 适合于中性或酸性成分（包括非极性和极性较小的化合物）分离，但不宜直接用于分离碱性物质。 吸附剂 分类 （2）氧化铝:色谱用氧化铝有碱性、中性和酸性之分，其中以中性氧化铝使用最多。 主要适用于碱性或中性亲脂性成分的分离，如生物碱、萜类等成分。 薄层色谱用硅胶商品型号： 主要有G 型（含煅石膏12～14％） 、 H型（不含粘合剂）、 GF254 型（含有无机荧光剂） 硅胶、氧化铝的吸附能力：分为Ⅰ～Ⅴ个活性级别。 含水量越少，活性级别越低，吸附能力越大；反之，含水量越多，其活性级别越高，吸附能力就越小。 吸附剂 活化：将吸附剂加热除去吸附的水分，重新显示吸附活性的过程。 硅胶的活化温度到170℃易发生硅醇基脱水，从而失去吸附活性，因此，活化不宜在较高温度下进行。 硅胶的活化条件：100～110℃活化30分钟。 氧化铝的活化条件：105～120℃活化30～60分钟 吸附剂 （3）聚酰胺：商品名为锦纶、尼龙，是由酰胺聚合而成的一类高分子化合物。在极性溶剂中分子结构中的酰胺基可与酚类、酸类或醌类成分形成氢键（极性键）；在非极性溶液或碱性溶液中，氢键无法形成，聚酰胺作为极性吸附剂发挥分离作用。聚酰胺吸附容量大，适合于制备性分离。商品聚酰胺有聚酰胺薄膜成品，可用于薄层色谱，另有颗粒状聚酰胺用于柱色谱。 （4）活性炭：是非极性吸附剂。有较强的吸附能力，特别适合于分离氨基酸、糖类及某些苷类等水溶性物质。活性炭在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。故水洗脱能力最弱，而有机溶剂则较强。活性炭对不同物质的吸附力是不一样的。对极性基团多的化合物吸附力大，而对极性基团少的化合物则吸附力小；对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物；对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。 展开剂的选择：综合考虑被分离成分和吸附剂的极性。 用极性吸附剂时，根据被分离成分的极性选择相应极性的展开剂。 展开剂的展开能力： 对于极性吸附剂，展开剂的极性越大，其展开能力越强，化合物在色谱中移动的速度就越快。 展开剂 在吸附剂与展开剂已被确定的情况下，分离情况将直接与被分离成分的结构和性质有关。以硅胶作吸附剂为例： 吸附规律： （相似者易吸附） 被分离物质极性越强，吸附越牢； 极性越弱，吸附越弱。 分离规律: 极性强的吸附牢，展开距离短，Rf值小 极性弱的吸附弱，展开距离长，Rf值大 被分离成分 TLC 知识拓展——化合物的极性判断 1.常见取代基极性顺序: 烷基＜烯基＜醚基＜酯基（—COOR）＜酮基（ C=O）＜醛基（—CHO） ＜氨基（—NH2）＜醇羟基（—OH）＜酚羟基（Ar—OH）＜羧基（—COOH） 知识拓展——化合物的极性判断 2.判断原则 （1）取代基种类——母核相同，按取代基极性顺序排列 （2）取代基数目——极性取代基多者，分子极性强 （3）取代基排列——易形成分子内氢键者和有空间位阻者，极性取代基的极性下降。 （4）母核不同，按C / O、 C / N 比值判断，比值高者，极性小，比值小者，极性大。（经验法） （5）同系物，分子量越小，极性越大。 4. 色谱操作步骤 铺板（制板）→点样→展开→显色→计算比移值（Rf值） （1） 制板 干法铺板