有机酸的测定.pptVIP

2021/2/6 * 酯化 用上述方法制备的有机酸中,加丁醇2mL,无水硫酸钠2g,浓硫酸0.2ml,连接冷凝管,在电热板上平稳沸腾约30min(加热时要不断搅拌),使有机酸成为丁酯。 酯的提取 酯化终了,加水和己烷各5mL充分混合,使酯转溶于己烷中,每次用己烷5mL提取3次。用移液管移入20ml容量瓶中,用己烷定容。再加无水硫酸钠0.5g,去除混入的微量硫酸。取5μL进行气相色谱分析。 2021/2/6 * 分析 柱子在60℃下保持6min后,以每分钟升温5℃速度升至250℃。氮气、氢气、空气的流量分别为60、50、900mL／min,注入口及检测器的温度为260℃。Sensitivity为10MΩ,Range为0.01V。 工作曲线的制备 将已知浓度的标准有机酸用上述方法制成丁酯后,用气相色谱仪分析,制成标准曲线。 2021/2/6 * 注释 试样制备过程中,用温水80℃或800ml/L乙醇提取。样品中酸的形态:游离态、结合态,温水提取结合态酸的效率比乙醇高。蔬菜中的有机酸,50％～90％以结合酸的形式存在,乙醇提取比用温水的提取率低。 其中所含总有机酸换算成柠檬酸要在100mg以下。水果新鲜物重1～10g,蔬菜10-15g。 2021/2/6 * 薯类的温水提取试样,用离子交换树脂处理需要较长的时间,所以用800ml/L乙醇提取试样,馏去乙醇后,进行离子交换树脂处理。 大部分蔬菜试样有时混入一些丁醇不溶物或酯化反应液呈浅褐色,对测定值无影响。 对于含结合酸多的水果,用温水提取的提取率高。但果胶等混入,粘度将增大,往往会使以后的处理费事,故乙醇的浓度应选择适当（800 ml/L ）。 2021/2/6 * 浓缩使用旋转蒸发器即可,如能进行冷冻干燥则更好。 酯化时使用油浴也可,使用电热板从试管底部加热方便。沸腾激烈时用滑线变压器调节。 2021/2/6 * 思 考 题 1、有机酸的总酸度、有效酸度和挥发性酸度测定的意义和方法原理是什么? 2、气相色谱法,液相色谱法测定有机酸的方法原理有什么不同?这两种方法的主要操作步骤和方法要点有哪些? 2021/2/6 * 思 考 题 2021/2/6 * 2021/2/6 * 精品课件! 2021/2/6 * 精品课件! 2021/2/6 * Sensitivity-敏感性， Range- 2021/2/6 * 4．磷酸的浓度:1︰9,50ml加1ml。 5．挥发性酸的滴定须把蒸出液为300ml左右。 6．滴定终点,1min不褪色为终点。 7.挥发性酸的结果计算以蚁酸计。蚁酸的摩尔质量为60g。 2021/2/6 * 有效酸度(pH)的测定 果蔬食品的pH值的变动不仅取决于原料品种和成熟度,而且取决于加工方法。 其pH值与总酸度之间没有严格的比例关系,pH值的大小不仅取决于酸的数量和性质(种类),而且受其中的酸、果胶、某些盐类和蛋白质缓冲能力的影响。 2021/2/6 * 提取: 一般的果蔬样品,与水1︰1研磨,过滤; 干果、籽粒,水2-3倍,沸水煮30min,过滤测定。 测定 pH值测定的方法应用最广泛的有:pH试纸法、标准色管比色法和pH计测定法。其中以pH计法最准确,操作也简便、迅速,可排除或减小这些样品中所含的色泽和杂质对测定结果所造成的影响,测得较准确的数据。 2021/2/6 * pH计的型号很多,使用时参照说明书即可。pH标准溶液可以用国家计量管理机关提供的标准物质按规定配制;或按一般专业书籍上的配方配制。 2021/2/6 * 水果、蔬菜等有机酸组分的测定 ( 高效液相色谱法 ) 有机酸是果、蔬的主要组成分之一。果、蔬中有机酸的种类和含量变化很大。这些变化决定于品种、成熟度、气候条件及其它因素。果蔬中苹果酸和柠檬酸的一般含量范围见表17-1。 2021/2/6 * 2021/2/6 * 方法原理 样品经处理后,直接将样品液注入反相化学键合相色谱体系,用5g·L-1(NH4)2HPO4 为流动相,有机酸在两相中分配分离; 按照其碳原子数由少到多的顺序从色谱柱中洗脱下来; 用紫外检测器(214nm)或示差折光检测器或二极管阵列检测器检测并与标准样品比较定量。 2021/2/6 * 操作步骤 有机酸标准溶液的制备 分别取适量有机酸单个标准样,如酒石酸、苹果酸、柠檬酸、琥珀酸等于25mL容量瓶中,用0.01mo1/LNaOH溶液溶解后定容,参照表17-1的含量范围配制标准浓度系列。 2021/2/6 * 样品溶液的制备 液体样品:需经合适倍数稀释,用Sep-PAK C18净化柱处理（有色素等杂质,会干扰有机酸的分析,同时造成色谱柱的污染,因此,在样品前处理中必须将其去除）,收集馏出液,经0.45μm微孔滤膜过滤后备用。 2021