白薇提取物的抗氧化和抑菌活性.docxVIP

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白薇提取物的抗氧化和抑菌活性 白薇( Cynanchumatratum )为萝摩科( Asclepiadacea )鹅 绒藤属(Cy nan chum 植物直立白薇(Cy nan chumatratum Bunge) 或蔓生白薇( Cynanchum versicolor Bunge )的干燥根及根茎, 在全国大部分地区均有分布, 主要生长于山地。 据《中药大辞典》 记载,白薇根及根茎部分可供药用,有“清热散肿、利尿通淋、 解毒疗疮”的功效。 目前,国内外对白薇的研究主要集中在化学 成分的分离鉴定与药理作用。 化学成分研究表明, 白薇主要含有 C21甾体皂苷、白薇素、挥发油、强心苷,而且发现白薇皂苷具 有抗菌消炎作用 [1] 。 柑橘是我国南方的主要水果品种之一, 在采后贮藏过程中易 受青绿霉菌侵染,导致果实腐烂,随后大量病果被到处丢弃,造 成巨大的经济损失、环境污染。另外,受空气中的氧和果实中酶 的作用, 果实油脂中的不饱和脂肪酸会氧化分解为醛、 酮和低级 脂肪酸,降低果实的品质 [2] 。为了降低采后柑橘果实烂果率, 目前生产上主要使用咪鲜胺、 噻菌灵等化学杀菌剂, 而使用化学 杀菌剂易造成果实药剂残留,危害人体健康。面对这种情况,开 发具有较强抗氧化性和能抑制柑橘等植物采后主要病害病原菌 双重功能的保鲜剂是比较理想的办法。 笔者所在课题组前期筛选 发现,白薇对柑橘青霉菌具有较强的抑制作用。因此,本研究以 石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、水为提取溶剂,采 用超声波辅助方法提取白薇, 比较白薇不同溶剂提取物体外抗氧 化性和对柑橘采后主要病原菌意大利青霉( Penicillium italicum )的抑菌活性;进一步研究白薇乙醇提取物对其他 15 种植物病原菌的抑菌活性, 以期为植物源果蔬保鲜剂相关研究提 供参考依据。 1 材料与方法 试验材料 白薇,购自江西省樟树市华丰药业 XX公司,粉碎,过40目 筛,常温保存备用。柑橘青霉病病菌:柑橘意大利青霉( P. italicum );枣褐斑病病菌:枣拟茎点霉菌( Phomopsis mauritiana );柑橘黑腐病病菌:柑橘链格孢菌( Alternaria citri );柑橘蒂腐病病菌:柑橘囊孢壳菌( Phytophthora capsici );莴苣菌核病病菌:莴苣菌核核盘菌( Sclerotinia sclerotiorum );辣椒疫病病菌:辣椒疫霉( Phytophthora capsici );柑橘酸腐病病菌:柑橘白地霉( Geotrichum citri-aurantii );茄褐纹病病菌: 茄褐纹拟茎点霉 (Phomopsis vexans );柑橘灰霉病病菌:柑橘灰霉菌( Botrytis cinerea ); 芦笋茎枯病病菌: 芦笋天门冬拟茎点霉 (Phomopsis asparagi ); 西瓜枯萎病病菌:西瓜尖镰孢菌( Fusarium oxysporum f.sp. n iveum);柑橘绿霉病病菌:柑橘指状青霉( Pe nicillium digitatum );猕猴桃软腐病三大致病菌:葡萄座腔菌 ( Botryosphaeria parva )、猕猴桃拟盘多毛孢菌 ( Pestalotiopsis fici )、猕猴桃拟茎点霉( Phomopsis sp. )。 以上菌株均由江西农业大学农学院植物病理实验室提供; PDA培 养基,笔者所在实验室自制。 仪器与试剂 HH-6恒温数显水浴锅(常州国华电器 XX公司);5804R冷 冻离心机(德国 Eppendorf ); R-3 旋转蒸发仪(瑞士 BUI); KQ-500B超声波清洗机(昆山超声仪器 XX公司);Y XQ-LS-70A 立式压力蒸汽灭菌器(上海博迅实业 XX公司);MIR-254恒温 培养箱(日本三洋电机公司); LX-300 冷却水循环机(北京长 流科学仪器公司);HS-1300U超净工作台(苏静集团苏州安泰 空气技术XX公司);UV-2450紫外-可见分光光度计(日本岛津 公司);AUY220电子分析天平(日本岛津公司); FW10C高速万 能粉碎机(天津市泰斯特仪器 XX公司)。 福林酚( Folin-Ciocalteu )试剂、 1,1- 二苯基 -2- 三硝基 苯肼(DPPH,购自Sigma公司(美国);没食子酸、芸香苷标 准品,购自中国生物制品研究所 (北京) ;其他试剂为市售试剂, 所有试剂均为分析纯产品。 白薇提取物样品的制备 称取 30 g 备用药粉,共 6 份,分别加入 1 L 不同溶剂(石 油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、蒸馏水),超声波辅 助提取2 h (40 kHz , 25 C),抽滤,滤渣加1 L相同溶剂重 复提取1次。将2次滤液合并,于4

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