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基因与基因工程专题 Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ 有关考点 要求 基因工程及应用 基因的概念 —— DNA 片段中的遗传信息 DNA （基因）分子结构主要特点 DNA （基因）分子复制过程 基因的表达 基因分离和自由组合定律 基因与性状的关系 基因位于染色体上的实验证据 基因突变的特征和原因 基因重组及意义 基因拼接的理论基础 （ 1 ） DNA 双螺旋结构 （ 2 ） DNA 的基本组成单位相同 外源基因表达的理论基础 （ 1 ）生物界共用一套遗传密码 （ 2 ）遗传信息的传递都遵循中心法则 一．基因工程的概念 基因工程的原理 基因重组 1 ．基因工程的基本工具的比较 ( 见下表 ) 限制酶 DNA 连接酶 载体 作用 切割① _________ 和载体 拼接 DNA 片段，形成 重组 DNA 携带② _________ 进入 受体细胞 作用 部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的③ __________ 作用 特点 ( 条件 ) (1)E·coliDNA连接 酶只能连接④ ________ (2)T 4 DNA 连接酶能连 接黏性末端和平末端 常用 类型 Eco R Ⅰ限制酶 Sma Ⅰ限制酶 E·coliDNA连接酶 T 4 DNA 连接酶 ⑥ _____ 、λ噬菌体的 衍生物、动植物病毒 目的基因 目的基因 磷酸二酯键 黏性末端 质粒 (1) 识别双链 DNA 分子特定 的核苷酸序列 (2) 在特定位点上切割 (1) 能在宿主细胞内稳定 存在并大量复制 (2) 有一个或多个限制 酶切割位点 (3) 具有特殊的标记基因 (4) 对受体细胞是无害的 下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是 A ．①② B ．①③ C ．①④ D ．②③ 【拓展延伸】 限制酶、 DNA 连接酶、 DNA 聚合酶、解旋酶、 RNA 聚合酶的比较 种类 项目 限制酶 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 解旋酶 RNA 聚合酶 逆转录酶 作用 底物 作用 部位 作用 结果 DNA 分子 DNA 分子 片段 脱氧 核苷酸 DNA 分子 核糖 核苷酸 磷酸 二酯键 磷酸 二酯键 磷酸 二酯键 磷酸 二酯键 磷酸 二酯键 碱基对间 的氢键 形成粘性末 端或平末端 形成重组 DNA 分子 形成新的 DNA 分子 形成脱氧 核苷酸链 形成新的 RNA 分子 脱氧 核苷酸 形成单链 DNA 分子 ①一般来说，天然运载体往往不能满足人类的所有要 求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的 运载体进行人工改造。 ②常见的标记基因有抗生素抗性基因、产生特定颜色 的表达产物基因、发光基因等。 ③作为载体必须具有一个至多个限制酶切点，而且每 种酶的切点最好只有一个。 ④注意与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作 用都不相同。 提醒 基因工程基本操作的四个步骤 1 、目的基因的获取 2 、基因表达载体的构建 3 、将目的基因导入受体细胞 4 、目的基因的检测与鉴定 ( 核心 ) 获取目的基因的三条途径： 1 、从基因文库中获取目的基因 2 、 PCR 技术扩增目的基因 mRNA 反转录 单链 DNA 酶 双链 DNA （ cDNA ） 3 、人工合成 基因比较小，核苷酸序列又已知，可用 DNA 合成仪直接合成 基因组文库 部分基因文库（如 cDNA 文库） 与基因库意思 相同吗？ 下列关于 cDNA 文库和基因组文库的说法中，不正确的是（ ） A. cDNA 文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有 某种生物的全部基因 B. 如果某种生物的 cDNA 文库中的某个基因与该生物的基因组文 库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同 C. cDNA 文库中的基因都没有启动子 D. 一种生物的 cDNA 文库可以有很多种，但基因组文库只有一种 （ 2011 年江苏卷） 请回答基因工程方面的有关问题： ①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物 A 的 DNA 片段所占 的比例为 。 ②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。 15/16 三 (1) 利用 PCR 技术扩增目的基因，其原理与细胞内 DNA 复制类似。 图中引物为单链 DNA 片段，它是子链合成延伸的基础。 1. 目的： 标记基因的作用：鉴定受体细胞中 是否含有目的基因，并将 含有目的 基因的细胞 筛选出来。常用的标记 基因是 抗生素抗性基因 。 2 、启动子： 有 RNA 聚合酶结 合位点 第二步：表达载体的构建 使目的基因在受体细胞中 稳定存在 ，并且可 以 遗传至下一代 ，使目的基因能够表达和发 挥作用。 (2010· 江苏生物， 27) 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点， 图 1 、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶