生物化学：第八章 基因重组与分子生物学技术.pptVIP

（二）携带者测试 基因测试常用于检出隐性遗传病携带者，包括隐性遗传病受累个体家庭的其他成员和有特殊遗传病死亡家庭中的危险人群。例如囊性纤维变性是白种人儿童中最常流行的常染色体隐性遗传病，发病率为1/2500；携带者普查阳性的夫妇生育受累儿童的危险性为1/4；双亲阴性者为1/109 200；若配偶一方为阳性、另一方为阴性，其危险性为1/661。由此可见，如果能建立可行的携带者测试方法，并能检出其绝大多数携带者，这对指导婚姻和生育是很有价值的。 （三）证候前诊断 对于某些单基因紊乱所引起的综合征，仅至晚年才会有明显表现，如成年多囊性肾病和Huntington病。由于对某些成年发病有关基因已有所掌握，故可在综合征发生前作出预测，协助他们作生活方式的调节、工作调整及生育的选择等。 （四）遗传病易感性 很多遗传病并非限于单基因缺陷，而是由多基因受累或者是由遗传和环境因素综合作用引起的。在这种情况下，一个或多基因缺陷的存在会使个体对发病诱因极度敏感而易于发病。比如，有LDL受体基因缺陷的个体同时有高胆固醇血症，其冠状动脉患病率要比单纯高胆固醇血症者为高，这是不难理解的。一个发病个体的结局也依赖于其他基因缺陷和环境因素、生活习惯的影响。因此，根据DNA诊断，做好疾病的早期预防并注意环境卫生和个人生活方式，可以达到预防的目的。 作业 选择一个感兴趣的分子生物学技术，简单阐明其原理及应用； 不要超过1页word，文件名：班+学号+姓名； 以班为单位电子版传给我-班长或学委统一发给我； 截止日期：5月6日之前 邮箱：qiww3@mail.sysu.edu.cn （一）基因芯片的应用 ①DNA序列分析； ②基因表达水平的检测，其原理是基于双色荧光探针杂交系统的应用； ③基因诊断，从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱，从患者的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱； ④药物筛选； ⑤给药个性化； ⑥此外，基因芯片在新基因发现、药物基因组图、中药物种鉴定、DNA计算机研究等方面都有应用价值。 （二）蛋白质芯片 蛋白质芯片基本原理是将各种蛋白质有序地固定于滴定板、滤膜和载玻片等各种载体上成为检测用的芯片，利用蛋白质分子间的亲和作用，用标记了荧光素的蛋白质或其他成分与芯片结合，经漂洗将未能与芯片上的蛋白质互补结合的成分洗去，再利用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术，测定芯片上各点的荧光强度，通过荧光强度分析蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系，由此达到测定各种蛋白质功能的目的。 广泛应用于蛋白质表达谱、蛋白质功能、蛋白质相互作用的研究，在临床疾病诊断和新药开发的筛选上也有很大的应用潜力。 二、基因组学相关技术 基因组是泛指一个生命体、病毒或细胞器的全部遗传信息，在真核生物，是指一套染色体（单倍体）DNA。 1986年美国科学家Thomas Roderick提出了概念，是指对所有基因进行基因组作图（包括遗传图谱、物理图谱、转录本图谱），核苷酸序列分析，基因定位和基因功能分析的一门科学。 因此，基因组研究应该包括两方面的内容：以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学，又被称为后基因组研究。 （一）结构基因组学 结构基因组学是基因组学的一个重要组成部分和研究领域，它是一门通过基因作图、核苷酸序列分析确定基因组成、基因定位的科学，根据使用的标志和手段不同，作图有三种类型，即构建生物体基因组高分辨率的遗传图、物理图谱、序列图谱和转录本图： ①遗传图谱，通过遗传重组所得到的基因线性排列图称为遗传连锁图； ②物理图谱，物理图谱是利用限制性内切酶将染色体切成片段，再根据重叠序列把片段连接成染色体，确定遗传标志之间物理距离的图谱； （一）结构基因组学 ③序列图谱，为人类基因组的全部核苷酸排列顺序。是最详细和最准确的物理图谱。 ④转录图谱，利用EST作为标记所构建的分子遗传图谱被称为转录图谱。通过从cDNA文库中随机调取的克隆进行测序所获得的部分cDNA的5′或3′端序列称为表达序列标签（EST），一般长300～500bp。转录图谱即为基因图谱，是编码蛋白质的序列在基因组中的位置。 （二）功能基因组学 ①鉴定DNA序列中的基因，即对基因组序列进行注释，包括鉴定和描述推测的基因、非基因序列及其功能； ②同源搜索设计基因功能，通过核苷酸或氨基酸序列的同源性比较，可以推测基因组内相似功能的基因，同源基因在进化过程来自共同的祖先； ③实验性设计基因功能，对基因进行缺失或剔除是采用最常用的实验方法，结合缺失或剔除后观察到的表型变化即可推测基因功能； ④描述基因表达模式： 转录组是指一个细胞内的一套mRNA转录产物，包含了某一环境条件、某一生命阶段、某一生理或病理状态下，生命体的细胞或组织所表达的基因种类和水平； 蛋白质