经典液相色谱.ppt

经典液相色谱法;第一节 概述;精品资料; 你怎么称呼老师？ 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？ 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ 教师的教鞭 “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……” “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”;;二、分类： 按操作状态分类： 柱色谱-column chromatography 平面（板）色谱-planar chromatography →薄层色谱-thin layer chromatography,TLC 纸色谱-paper chromatography,PC 按分离原理分类： 吸附色谱-absorption chromatography 分配色谱-partition chromatography 离子交换色谱-ion exchange chromatography 体积排阻色谱-size exclusion chromatography 亲和色谱-affinity chromatography ;第二节 经典液相色谱分离机制;1.吸附过程及流出曲线： 根据吸附平衡方程： Cm ? Cs 平衡常数 K= Cs/ Cm 假设：在整个色谱分离过程中平衡保持，即 平衡常数 K 保持不变。 每一组分分别有其吸附平衡。 ⑴若 Cm ? Cs 即样品某组分完全被吸附剂滞 留或流动相对组分完全无解吸 能力；称之为“永久性吸附”， 或称该组分“完全不被流动相 洗脱”。 ;⑵若 Cm ? Cs 即样品某组分随着流动相的流 动被溶解解吸而下移，在下移 过程中“旧平衡”被破坏建立起 “新平衡”；如此反复多次重 复，该组分最终被洗脱。 组分的下移速度的主要影响因素： ①平衡常数 K ； K 越小该组分移动越快 K 大小取决于吸附剂的吸附能力（越强该组分移动月慢）流动相的溶解解吸能力（越强该组分移动越快） ②流动相的流速。越快则所有组分移动越快;2.吸附过程的影响因素： ⑴吸附等温线： 温度直接影响分子本身的能量，同时影响吸附剂的吸附能力，因此温度是吸附过程的重要影响因素。 在相同温度下，吸附过程由平衡常数K 决定。 ①当K 为常数时，吸附等温线为直线； 在吸附剂未被该组分饱和时发生，该组分在吸附色谱体系中如同“塞子”般移动；其流出曲线为对称的“高斯分布”曲线。 ;;② K 不等于常数时，吸附等温线为非直线； 如果吸附剂表面被该组分饱和，吸附等温线为“凸型”；组分集中部分比稀少部分移动速度快，流出曲线为“拖尾型”。 如果吸附过程中同时有其它化学反应或过程存在，吸附等温线为“凹型”；其他反应或过程加速部分组分的移动，流出曲线为“前伸型”。 ;⑵吸附剂的活度： 吸附剂的活度由吸附剂的表面能决定，表面能越大，吸附活性越强。 影响吸附剂表面能的因素主要有： 吸附剂的表面积（或比表面）； 吸附剂的孔结构； 吸附剂活性点的远程化学作用力。 等 ;⑶组分的化学结构： 不同的化学结构有不同的电子分布，产生不同的被吸附能力。 一般规律； 官能团极性大，极性官能团多，吸附强； 不饱和化合物的吸附强于饱和化合物； 共轭双键吸附强，双键多吸附强； 同系物分子量大，吸附强； 组分的空间排列影响其吸附性。;⑷流动相： 流动相的极性与组分极性“相似”则组分被流动相溶解解吸的能力强，相对被吸附剂吸附的能力减弱。 因此，选择流动相的基本原则是“相似相溶”。;二、分配分离机制： --利用样品中各组分在互不相溶的固定相流动相液体中的溶解度差异，随着流动相的流动各组分产生差速运动而达到分离。 固定相—液体（又称固定液） 适量固定液均匀凃布于支撑物（载 体-有合适表面能的特殊吸附剂） 上，与流动相液体互不相溶。 流动相—一种或几种溶剂的组合 推动力与吸附分离相同。;1.分配过程与流出曲线： 根据分配平衡原理：Cm ? Cs K= Cs/ Cm 假设：K