中国核酸疫苗发展前景.docxVIP

中国核酸疫苗发展前景 ? ? 疫苗是将病原微生物及其遗传物质或代谢产物, 经过人工减毒、灭活或利用转基因等方法制成的用于预防传染病的生物制剂. 暴露于此类病原体会诱导产生具有病原体特异性的免疫细胞, 从而使人体长时间保留免疫记忆. ? ? 疫苗的发现在人类历史长河中具有里程碑式的意义, 曾夺走数亿人生命的天花病毒在牛痘疫苗出现后便被彻底消灭, 之后的两百多年中针对狂犬病、结核、小儿麻痹症等几十种传染性疾病的疫苗也被相继发现. ? ? 减毒疫苗（Live゛ttenuated vaccine）是指病原体经过甲醛处理后, 毒性亚单位的结构改变, 毒性减弱, 结合亚单位的活性保持不变, 依然保持了抗原性的疫苗. 减毒活疫苗接种后不会引起疾病的发生, 但病原体可以引发机体免疫反应, 刺激机体产生特异性的记忆 B细胞和记忆 T 细胞, 起到获得长期或终生保护的作用. 这类疫苗的优势在于诱导产生的抗原数量、性质和位臵均与天然感染相似, 因此免疫力强、作用时间长. 但对于儿童及老年人等免疫力较差的接种者, 有一定可能发生突变并恢复毒力, 存在潜在的致病危险. ? ? 灭活疫苗（Killed vaccines）是指先对病毒或细菌抗原进行培养, 然后用加热或化学剂将其灭活所制成的疫苗. 灭活疫苗可以由整个病毒或细菌组成, 也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗. 与减毒疫苗相比, 灭活疫苗采用的是非复制性抗原, 因此安全性好, 但同时也牺牲了一定的免疫原性, 通常需要加强免疫. ? ? 随着分子生物学技术的发展, 疫苗模拟病原体的方式得到进一步的丰富, 亚单位疫苗和重组疫苗应运而生. 亚单位疫苗是通过化学分解或有控制性的蛋白质水解方法使天然蛋白质分离, 提取细菌、病毒的特殊蛋白质结构, 筛选出具有免疫活性的片段制成的疫苗. ? ? 重组疫苗（Recombinant vaccine）是利用基因工程技术, 将病原体能诱发机体免疫应答的蛋白质对应的 DNA 插入细菌、酵母或哺乳动物细胞中, 经表达、纯化后而制得的疫苗. 与减毒/灭活疫苗相比, 第二代疫苗的副作用以及引起相关疾病感染的风险进一步降低. 目前应用较为广泛的乙肝疫苗（HepB）和宫颈癌疫苗（HPV）就是第二代苗疫苗的成功典范. 重组疫苗的制造流程 ? ? 核酸疫苗（Nucleic acid vaccine）, 又称基因疫苗（Genetic vaccine）, 是最近几十年从基因治疗研究领域发展起来的一种全新的疫苗技术. 其将抗原蛋白对应的 DNA或 mRNA 序列直接导入被接种者细胞, 通过宿主细胞的转录系统转录并翻译成抗原蛋白, 诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答, 从而使被接种者获得相应的免疫保护. ? ? 核酸疫苗通常包含一个能在哺乳细胞高效表达的强启动子元件例如人巨细胞病毒的中早期启动子；同时也需含有一个合适的 mRNA 转录终止序列. 肌内注射后, DNA 进入胞浆, 然后到达肌细胞核, 但并不整合到基因组. ? ? 宿主细胞内产生的抗原蛋白会被抗原提呈细胞（APC）识别并分解为由若干个氨基酸组成的多肽片段, 并将这些片段与不同类型的 MHC 复合体相结合并呈递. ? ? MHC-I类复合体结合 CD8+型 T 细胞（CTL）, 促进 CTL 释放穿孔素和颗粒酶将表达外源蛋白的细胞杀死, 形成细胞免疫. MHC-II 类复合体结合 CD4+型 T 细胞, CD4+型T 细胞会进一步结合并激活 B细胞合成相应的抗体, 形成体液免疫. 核酸疫苗抗原呈递及免疫应答原理 核酸疫苗特殊的免疫机制优点 抗原自然性 表位广谱性 生产和贮存便利 给药量级低 核酸疫苗诱导的免疫反应与病毒自然感染所产生的免疫应答相似度极高，由于 DNA 或 mRNA 在接种者体内转录和表达产生内生抗原，因此能够克服蛋白亚基疫苗在体外利用工程菌合成时易发生错误折叠和糖基化不完全等问题。 与传统疫苗相比，核酸疫苗接种后在宿主细胞内表达抗原蛋白，直接与抗原呈递复合体结合，同时引起细胞免疫和体液免疫，因此诱导产生的抗原特异性免疫反应具有广谱性。由于 CTL 应答也是机体杀死癌变细胞的有效清除途径，因此核酸疫苗在技术上能够对非病毒诱导的癌症进行预防。 核酸疫苗通常只需要构建高效的表达质粒在细菌中生产，与传统疫苗相比省去了抗原提取和纯化等成本较高的工艺流程，生产成本低廉。DNA 稳定性好，大量变异的可能性较低，利于质量控制。加工完成的 DNA 疫苗可以干燥加工成微粒，在室温下也能够稳定的储存和运输。 核酸疫苗抗原合成稳定性良好，能够在接种者体内长期储存并持续诱导免疫应答，因此能够减少加强注射的剂量，毫克或微克级的核酸片段就能够活化细胞毒性 T 细胞。 ? ? 一、应用领域 ? ? 1、急性传染病 ? ? 20