生物化学第十三章 生物氧化.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 3.超氧化物歧化酶 * 2O2﹣+ 2H+ SOD H2O2 + O2 过氧化氢酶 H2O + O2 SOD：超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase) 二、微粒体细胞色素P450单加氧酶体系 单加氧酶 催化氧分子中的一个氧原子加到底物分子上(羟化)， 另一个氧原子被氢（来自底物NADPH+H+）还原成 水，故又称混合功能氧化酶或羟化酶 。 催化的反应： RH+NADPH+H+ +O2 → ROH+NADP++H2O * * 微粒体细胞色素P450单加氧酶反应机制 Thank you * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 复合体Ⅳ将电子从细胞色素c传递给氧。 * 复合体Ⅳ （细胞色素氧化酶） 复合体Ⅳ 还原型Cyt c → → O2 CuA→a→a3→CuB （三）呼吸链组分的排列顺序 通过下列实验确定： 标准氧化还原电位 各组分特有的吸收光谱的不同进行检测 特异的抑制剂 拆离或重组各复合体 * * 呼吸链中各种氧化还原对的标准氧化还原电位 氧化还原对 EΘ（V） 氧化还原对 EΘ（V） NAD+ /NADH+H+ FMN/FMNH2 FAD/FADH2 Cyt bL(bH) Fe3+ /Fe2+ Q10 /Q10H2 - 0.32 - 0.219 - 0.219 0.05（0.10） 0.06 Cyt c1 Fe3+ /Fe2+ Cyt c Fe3+ /Fe2+ Cyt a Fe3+ /Fe2+ Cyt a3 Fe3+ /Fe2+ 1 /2O2 /H2O 0.22 0.254 0.29 0.35 0.816 主要的呼吸链 NADH氧化呼吸链 NADH→复合体Ⅰ→ Q →复合体Ⅲ→ Cyt c → 复合体Ⅳ → O2 2. 琥珀酸氧化呼吸链 琥珀酸→复合体Ⅱ→ Q →复合体Ⅲ→ Cyt c → 复合体Ⅳ → O2 * 二 、氧化磷酸化 体内ATP生成的方式： 氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)是指在 呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化，生成ATP, 又称偶联磷酸化。 底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation) 是底物分子内部能量重新分布，生成高能键，使ADP磷酸化生成ATP的过程。 * (一)氧化磷酸化耦联部位 即ATP生成的部位 实验方法来确定： 测定不同作用物经呼吸链氧化的P/O比值 计算自由能变化 * P/O比值的定义 指每消耗1/2摩尔O2所生成ATP的摩尔数（或一对电子通过氧化呼吸链传递给氧生成ATP分子数）。 * 线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值 * 底 物 呼吸链的组成 P/O比值 ?-羟丁酸 NAD+→O2 2.4~2.8 琥珀酸 FAD →O2 1.7 抗坏血酸 Cyt c→O2 0.88 细胞色素C Cyt aa3→O2 0.61~0.68 三个偶联部位 * ATP ATP ATP ①NADH与CoQ之间 ②CoQ与Cyt c之间 ③Cyt aa3与氧之间 * 69.5kJ/mol 36.7kJ/mol 112kJ/mol NADH FMN （ F e - S ） CoQ C y t b C y t c 1 C y t c C y t a a 3 O 2 F A D （ F e - S ） 琥珀酸 ATP A D P + P i A T P ATP A D P + P i A T P ATP A D P + P i A T P - 0 . 3 2 - 0 . 219 1 + 0 . 0 5 + 0 . 0 6 + 0 . 2 2 + 0 . 2 54 + 0 . 2 9 + 0 . 8 16 0 . 3 6 V 0 . 19 V 0 . 5 8 V 2. 自由能变化( △G0′)  大于30.5kJ即可生成1摩尔ATP。△G0′＝－nF△E0′ NADH氧