《环境生物与微生物学实验》教学大纲.docVIP

— PAGE 6 — — PAGE 1 — 《环境生物与微生物学实验》 Experiments of Environmental Biology and Environmental Microbiology 一、基本信息 实验课程名称 环境生物与微生物学实验 课程代码 CB154019 实验课程性质 ?通识课程/?学科（专业）基础课程/?专业课程/?专业拓展课程 学 分 1.5 学 时 24 开课单位 资源与环境学院 适用专业 环境科学 先修课程 分析化学、有机化学 后续课程 水污染控制工程实验、固体废物处理处置实验 主要教学 参考书 选用的教材： 张清敏，环境生物学实验技术，化学工业出版社，2005年5月，第1版。 郑平，环境微生物学实验指导，浙江大学出版社，2005年5月，第2版。 主要参考书： 孔志明等，现代环境生物学实验技术与方法，中国环境科学出版社，2005年12月，第1版。 周群英，高廷耀，环境工程微生物学，高等教育出版社，2009年，第2版。 二、教学目的 （一）知识目标 《环境生物与环境微生物学实验》是为了配合《环境生物学》与《环境微生物学》课程的教学而设立的一门独立的实验课程。通过本课程的学习，使学生能够验证、加深和巩固理论课程所讲授的环境生物学与环境微生物学的知识。 （二）能力目标 训练学生应用环境生物学与环境微生物学的理论、方法和技术解决环境问题的基本技能。 （三）素质目标 培养学生独立思考、实事求是、严肃认真的科学态度和实验室工作的良好作风，为今后在相关领域具有独立工作和科研的能力打下良好的基础。 三、基本要求 （一）了解实验室工作的规章制度。 （二）理解环境生物与环境微生物学实验的基本原理和操作要点。 （三）掌握实验的基本方法和操作技能，实验的设计思路和测试技术，能够准确客观记录实验数据，学会观察实验中出现的现象并加以分析，认真撰写实验报告。 四、实验项目设置情况 序号 实验项目名称 学时 开出要求 实验项目类型 必做 选做 验证 综合 设计 创新 1 种子发芽和根伸长毒性试验 8 √ √ 2 显微镜的使用及典型细菌形态的观察 4 √ √ 3 培养基的制备和灭菌 4 √ √ 4 水中细菌总数的测定 4 √ √ 5 土壤环境功能微生物的分离、筛选与纯化 4 √ √ 五、各实验项目教学内容 实验项目一：种子发芽和根伸长毒性试验 8学时 （一）实验目的和要求 通过本实验掌握测定环境污染对植物有效性的方法，理解测定污染物对种子发芽和根伸长产生毒性的基本原理，掌握实验操作程序和步骤，能够独立进行实验数据计算和处理，并对结果进行分析。 （二）试验材料和仪器设备 1.试验材料：可选用小麦、水稻、大白菜、番茄、棉花等 2.仪器：直径90mm的硬质玻璃培养皿、受控环境生长箱 （三）实验内容 1. 实验原理 植物种子在适宜的条件下，吸水膨胀萌发，在各种酶的催化作用下，发生一系列的生理，生化反应。但当有污染物存在时，污染物会抑制一些酶的活性，从而使种子萌发受到影响，破坏发芽过程，因此，通过测定种子发芽和根系发育情况、生物量减少程度对污染物毒性效应的反应，对污染物的危害性进行诊断并对相应的生态风险作出评价。 种子在含一定浓度受试物的基质中发芽，当对照组种子发芽率在65%以上，根长达20mm时，试验结束，测定不同处理浓度种子的发芽率和根伸长抑制率。 2. 实验步骤 （1）每一植物种子试验，至少应有6个不同的处理浓度。浓度以几何级数选择。每一处理浓度应设3次以上重复，每一重复至少15粒种子。发芽试验期间温度控制在（25±1）℃，保持黑暗。 （2）采用土壤染毒法，称取50g干土于90mm的培养皿中，调节水土比为1:5，用医用小镊子将15粒种子播种于土壤中，盖好培养皿盖子，置于生化培养箱中25℃ （3）当植物对照芽长达20mm时，终止培养，取出发芽种子，测量根长、芽长、根数和发芽个数。 （4）置于烘箱中40℃ 3. 实验数据与处理 （1）确定种子发芽率和根伸长抑制率，抑制率=（1－处理/对照）×100% （2）利用Probit法对芽长、根长抑制率与化学品浓度进行回归分析，即：把化学品浓度转换成浓度对数，芽长、根长抑制率转换成概率单位，然后进行二者之间的回归分析。 （3）发芽势与发芽率的计算，分别于第3天和第7天测定记录种子发芽的情况，将感染霉菌的种子要及时除去。 发芽势（%）=规定天数内已发芽的种子粒数/供作发芽的种子总粒数×100 发芽率势（%）=全部发芽的种子粒数/供作发芽的种子总粒数×100 （4）种子发芽后应具备的特征：种子发芽标准为芽长＞3mm。根长测量时选取最长根长的主根。其中根长是指根和芽接点处到最长根尖的长度，芽长是根基点到牙尖的长度。以此标准进行观察，