药物研究的生物化学基础.pptVIP

DNA重组技术的主要应用： 1.运用DNA重组技术大量生产基因工程药物。 2.定向改造生物的基因结构，构建高产菌株，用于改造传统制药工业。 3.用于基础研究，用于基因结构与基因组功能的调节研究，用于分子杂交等。 第三十页，共68页。 第二节药物质量控制的生物化学基础 第三十一页，共68页。 一、药物质量控制的常用生化分析法 （一） 免疫分析法 1. 免疫扩散法 2. 免疫电泳法 3. 放射免疫测定法（RIA） 4. 酶联免疫测定法（ELISA） 就是让抗体或抗原与酶复合物结合，然后通过显色来检测。 第三十二页，共68页。 （二） 电泳分析法 第三十三页，共68页。 第三十四页，共68页。 （三） 酶法分析 第三十五页，共68页。 1.终止反应法 2.连续测定法 3.循环放大分析法 第三十六页，共68页。 二、生物药物质量控制的生化分析方法 （一） 多肽与蛋白质类药物的主要分析方法 1. 蛋白质药物的纯度分析 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) SDS毛细管电泳(CE) 等电聚焦(IEF) 高效液相色谱法 (HPLC) 第三十七页，共68页。 2. 多肽与蛋白质分子量的测定 使用较多的是超速离心法，凝胶层析法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法等。 超速离心法 凝胶层析法 第三十八页，共68页。 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 第三十九页，共68页。 3. 蛋白质的定量测定 （1） 物理性质：紫外分光光度法，折射率法， 比浊法。 （2） 化学性质：凯氏定氮法，双缩脲比色法， Folin-酚法，BCA法。 （3） 染色性质：考马斯亮兰G-250结合法、银染、 金染。 （4） 其他：荧光激发。 第四十页，共68页。 4.胶体金比色法 胶体金是一种带负电荷的疏水性胶体，加入蛋白质后，红色转变为蓝色，595nm处测定样品的吸收值，计算含量。 第四十一页，共68页。 5. 生物质谱法： 多肽和蛋白质的分子量可用MALDI/MS（基质辅助激光解吸离子化质谱法）或ESI/MS（电喷雾离子化质谱法）直接测定，用质谱法测定蛋白质的分子量简便，快速、灵敏、准确。 第四十二页，共68页。 （二） 核酸类药物的主要分析方法 1. 紫外分光光度法 ： 测定RNA与DNA含量260nm 2. 地衣酚显色法测定RNA含量 3，5-二羟甲苯 3. 二苯胺法测定DNA含量 第四十三页，共68页。 （三） 酶类药物的分析 酶类药物的主要质量指标是它的催化活力。 （四） 重组DNA药物中的可能杂质检查 1. 外源性DNA 2. 宿主细胞蛋白质 3. 二聚体或多聚体的测定 4. 降解产物的测定 第四十四页，共68页。 第三节药理学研究的生物化学基础 第四十五页，共68页。 神经递质 又称突触分泌信号(synaptic signal) 特点 由神经元细胞分泌； 通过突触间隙到达下一个神经细胞； 作用时间较短。 例如： 乙酰胆碱、去甲肾上腺素等 一、药物作用的生物化学基础 （一）神经传导与神经递质 第四十六页，共68页。 乙酰胆碱受体功能模式图 1.受体-离子 通道型 （二）受体的结构与功能 第四十七页，共68页。 ※ G蛋白(guanylate binding protein) 是一类和GTP或GDP相结合、位于细胞膜胞浆面的外周蛋白，由?、?、? 三个亚基组成。 有两种构象：非活化型；活化型 2．受体-G蛋白-效应蛋白型 第四十八页，共68页。 R Ｒ H AC γ α β GDP α GTP β γ 腺苷酸环化酶 AC ATP cAMP 第四十九页，共68页。 与配体结合后具有酪氨酸蛋白激酶活性，如胰岛素受体?insulin growth factor receptor, IGF-R?? 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGF-R)。 第五十页，共68页。 药物研究的生物化学基础 第一页，共68页。 第一节 生物药物制造的生物化学基础 一、生物药物制备方法的特点 （1）目的物存在于组成非常复杂的生物材料中 （2）