土壤蔗糖酶活性测定方法.docx

土壤蔗糖酶活性测定 1.原理 采用 3,5-二硝基水杨酸比色法。 该方法以蔗糖为基质， 基质在土壤蔗糖酶作用下生成葡 萄糖，葡萄糖和 3,5-二硝基水杨酸反应生成橙黄色的 3-氨基 -5- 硝基水杨酸，并在 508nm 波 长下有最大吸光值。 2.测定方法 ①称取壤土 0.15g、砂土 0.3g、粘土 0.1g 风干土于 10mL 离心管中，加入 0.06 mL 甲苯 和 1mL ph5.5 磷酸缓冲液，再加 3mL 8% 蔗糖溶液，摇匀后加盖，放进 36~37℃的培养箱中 进行培养 24 个小时； ②培养完成后取出，摇匀，并于 4000r/min 离心 5min； ③取上层清液 0.2ml 于 20ml 玻璃管中，并加入 管沸水浴中加热 5min，加热完毕后在自来水流下冷却 ④将显色液体用蒸馏水稀释到 5ml ，在 508nm 3.蔗糖酶标准曲线的测定方法 （ 1）葡萄糖标准溶液的配制 0.5ml3,5- 二硝基水杨酸，再立即将玻璃 3min； 波长下比色，记录吸光值。 a. 饱和苯甲酸溶液的配制 在洁净的烧杯中加入适量蒸馏水， 慢慢加入少量苯甲酸同时用玻璃棒搅拌， 直至苯甲酸溶 解的同时出现析出的苯甲酸晶体为止。 b. 标准葡萄糖溶液的配制 称取 500mg葡萄糖溶解于适量苯甲酸饱和溶液中， 并取 100ml 容量瓶用苯甲酸饱和溶液定 容（ 5mg/ml）。 （2） . 操作步骤 a. 取 11 支洁净 20ml 玻璃管编号 0— 10。 b. 按下表加液 编号： 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 葡萄糖母液（ ml） 0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 饱和苯甲酸（ ml） 0.2 0.195 0.19 0.185 0.18 0.175 0.17 0.16 0.15 0.14 0.13 葡萄糖浓度（ mg/ml） 0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 吸光值（ A508nm） 0 0.05 0.117 0.227 0.31 0.392 0.49 0.666 0.839 1.006 1.176 c. 在玻璃管中各加入 0.5ml3,5- 二硝基水杨酸溶液， 并立刻放入沸水浴中加热 5min. 加热 后，立刻将玻璃管在流动自来水下冷却 3min. 冷却完毕后，用蒸馏水定容至 5ml. d. 将显色液在 508nm波长下比色。 4.计算 蔗糖酶活性以 24h 后 1g 土壤中含葡萄糖的 mg 数表示。 葡萄糖 (mg)=a× 100 a—从标准曲线查得的葡萄糖 mg 数 100—换算系数 小贴士：夏季养生常识 立夏已过， 炎热的夏季来了。夏季是充满生气的季节，但同时也要特别注意养生保健。 我们 该如何保持在炎热的夏季保持身体健康， 从而享受这个夏季呢？让我来告诉大家几个夏季养 生保健小常识吧。 1.夏季养生保健之多喝温水 每天要喝七八杯白开水，身体要随时保持水分和补充水分，水在人体内起着至关重要 的作明，维持着人体正常的生理功能。水是人体不可缺少的重要组成部分，器官、肌肉、血 液、头发、骨骼、牙齿都含有水分，夏季失水会比较多，若不及时补水就会严重影响健康， 易使皮肤干燥，皱纹增多，加速人体衰老。另外矿泉水、冷茶，牛奶，苹果汁是理想的解渴 饮料。 2.夏季养生保健之补钾 暑天出汗多，随汗液流失的钾离子也比较多，由此造成的低血钾现象，会引起人体倦 怠无力、头昏头痛、 食欲不振等症候。热天防止缺钾最有效的方法是多吃含钾食物，新鲜蔬 菜和水果中含有较多的钾，可多吃些草莓、杏子、荔枝、桃子、李子等；蔬菜中有大葱、芹 菜、毛豆等也富含钾。茶叶中亦含有较多的钾，热天多饮茶，既可消暑，又能补钾，可谓一 举两得。 3.夏季养生保健之尽量穿浅色衣服 深色衣服会吸收阳光，使人体温升高燥热；同时蚊子有趋暗的习性，深色容易吸引蚊 子，特别是黑色。 4.夏季养生保健之福自“苦”中来 苦味食品中