新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响.docVIP

新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响 1 文2：木黄酮对人垂体腺瘤细胞增殖的影响 8 图2略 12 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 15 文章致谢（模板） 15 正文 新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响 文1：新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响 Effects of Novel Human Chemokinelike Factor Superfamily 8 on Proliferation and EGFR Expression of HL60 Cells Abstract This study was aimed to investigate the effect of chemokinelike factor superfamily 8 (CKLFSF8) on proliferation and expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) of HL60 cells. Expression of CKLFSF8 mRNA on HL60 cell line was assayed by RTPCR; the target gene was trafected into the cells by lipid vector, cell proliferation was determined by MTT assay, while expression of EGFR in HL60 was determined by immunocytochemical technique. The results indicated that expression of CKLFSF8 existed in HL60 cells. After trafection, cell proliferation was inhibited (P﹤) and the expression of EGFR in HL60 cells was also discovered to be inhibited (P﹤). It is concluded that the proliferation and expression of EGFR in HL60 cells can be inhibited by trafection of CKLFSF8. The novel chemokine may provide a new approach in the treatment of leukemia. Key words CKLFSF8; HL60 cell; cell proliferation; EGFR 趋化因子（chemokine）是一组具有趋化活性的小分子蛋白质,在炎症、肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应及AIDS的演化等过程中发挥重要作用［1］。趋化素样因子超家族成员8 (chemokinelike factor superfamily， CKLFSF8)是新近发现的新型人类趋化因子。研究发现，大多数细胞内都有该因子的表达，在肝脏、肺脏和胰腺细胞内高表达；CKLFSF8 在某些肿瘤组织和肿瘤细胞中也有表达［2］，但有关CKLFSF8对肿瘤细胞表皮生长因子影响的研究报道尚少。为了探讨这种新的趋化因子在白血病的发生 发展 中的作用，我们选择白血病细胞株HL60为研究对象，观察新型细胞因子CKLFSF8对HL60的增殖和表皮生长因子受体 (epidermal growth factor receptor， EGFR)表达的影响。 材料和方法 菌株和质粒 DH5α购自Gibco公司。带有目的基因片段CKLFSF8的质粒和pEGFP由北京大学人类疾病基因研究中心马大龙教授惠赠。人白血病限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ为TakaRa产品。质粒提取试剂盒为Vegen产品。RPMI 1640及TRIZOL RNA提取试剂为Gibco产品。RTPCR试剂为上海生物工程技术有限公司产品。小牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品。转染试剂 LipofectamineTM2000为Invitrogen公司产品。山羊抗人EGFR抗体为Santa Cruz公司产品。免疫组织化学试剂盒为北京中杉生物技术有限公司产品。 HL60细胞的培养和RNA的提取 将HL6