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敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响 1 1 材料与方法 2 13 观察指标与方法 2 2 结果 3 22 经口暴露敌百虫对孕鼠生殖功能方面指标的影响(表1) 3 3 讨论 4 文2：敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响 5 1 材料与方法 5 13 观察指标与方法 6 2 结果 6 3 讨论 7 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 9 正文 敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响 文1：敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响 敌百虫是我国常用的有机磷农药之一。已有研究表明，在胚胎器官形成期，母鼠敌百虫的暴露可影响母鼠的生殖功能，导致子代生长发育迟缓和畸形的发生〔1,2〕，但上述研究中敌百虫染毒剂量均较大（200mg/kg）。本研究以目前广泛使用的有机磷农药之一敌百虫为受试物，以母鼠及子代胎鼠为研究对象，进行器官形成期母鼠经口暴露较低剂量的敌百虫对生殖、内分泌功能及胎鼠发育毒性影响的研究，探讨较低剂量有机磷农药暴露下的健康效应。 1 材料与方法 11 实验动物 选用昆明种10～14周健康小鼠（中科院上海分院动物研究中心）。室温（23±2）℃，湿度（50±10）%，并保证12h明暗循环的条件下，雌雄分笼饲养1周，然后按雄雌比1∶2比例合笼，次日清晨检查阴栓，并以阴栓阳性当日定为受孕第0d（Dg0）并记录当时体重。 12 分组及染毒 将46只孕鼠随机分为4组：分别为空白对照组（12只）、低剂量组（11只）、中剂量组（11只）和高剂量组（12只）。在孕鼠妊娠第6d开始，每日上午10：00点按照01ml/10g，根据体重确定相应给药量，并灌胃给药1次，3个染毒组剂量按低中高组分别为125，25和50mg/kg;每3d称重一次，同时根据体重调整给药量；对照组给予相应量的蒸馏水，连续染毒10d。各组小鼠均为普通饲料自由饮水。 13 观察指标与方法 131 母鼠观察 （1）一般急性毒性观察：观察染毒后母鼠活动度、精神状况和饮水、食物消耗量情况。（2）体重及脏器系数：在孕鼠妊娠17d，称重后用颈椎脱臼法处死孕鼠，立即剖腹，分离卵巢、胎盘并称重， 计算 脏器系数（=脏器重量/体重）。（3）黄体数、着床率： 将卵巢置于体视显微镜（Nikon C-DSS230）下观察卵巢黄体数，同时从孕鼠子宫逐个取出胎鼠，鉴别活胎、死胎、吸收胎，并计算着床总数（为活胎、死胎、吸收胎的总和）和着床率。（4）血清及卵巢匀浆雌二醇（E2）的测定：孕鼠被处死前，摘眼球取血，离心后取血清于-20℃冰箱保存；将卵巢置于少量生理盐水中-20℃条件下保存，测定时按1∶4的比例加入生理盐水，用1ml玻璃匀浆器制成卵巢组织匀浆。用ELISA（竞争法）测定小鼠血清和卵巢匀浆雌二醇浓度；试剂盒(美国Market公司)，灵敏度5pg/ml。 132 胎鼠观察［3］ （1）胎鼠平均体重:计算每窝胎鼠的全部活胎的平均体重。（2）外表畸形观察：按常规方法。 14 统计分析 应用SPSS115统计软件进行t检验和χ2检验。 2 结果 21 一般情况 在实验过程中，未发现小鼠出现有机磷农药急性中毒症状，所有小鼠全部生存至实验结束。从母鼠妊娠第6d开始染毒至妊娠第17d被处死，各实验组母鼠体重的变化与对照组比较，差异无统计学意义（P005） 22 经口暴露敌百虫对孕鼠生殖功能方面指标的影响(表1) 221 对孕鼠脏器系数、着床率的影响 与对照组比较，各实验组的卵巢脏器系数、胎盘脏器系数、平均黄体数和着床率差异无统计学意义（P005），各实验组的活胎、死胎和吸收胎的个数与对照组比较差异也无统计学意义（P005） 222 对孕鼠血清雌二醇浓度和卵巢雌二醇浓度的影响 除50mg/kg剂量组血清雌二醇浓度较对照组明显降低（P005）,其他剂量组与对照组比较则差异无统计学意义（P005）；各实验组小鼠卵巢雌二醇浓度较对照组差异无统计学意义（P005） 23 经口暴露敌百虫对胎鼠生长发育及外观畸形发生的影响(表2) 对照外观组畸形发生率为625%，实验组（染毒剂量由低到高）的畸形发生率分别为2835%，2484%和2215%，经χ2检验，各实验组畸形发生率较对照组有显著增高（P001），但各实验组之间的畸形发生率差异无统计学意义（P005）。25和50mg/kg剂量组的胎鼠平均体重与对照组比较差异无统计学意义（P005）。但125mg/kg剂量组的胎鼠平均体重与对照组比较明显降低（P001） 表1 敌百虫暴露对孕鼠生殖功能