β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究临床医学.docVIP

β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究临床医学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究临床医学 1 1 材料 3 2 方法 4 3 统计学分析 6 文2：衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达临床医学 10 1 材料和方法 12 2 结果 15 3 讨论 16 参考文摘引言： 18 原创性声明（模板） 20 文章致谢（模板） 20 正文 β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究临床医学 文1：β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究临床医学 Abstract: Objective To identify the effect of ITGB4BP(integrin beta 4 binding protein) on the production of extracellular matrix in The recombinant adenovirus pAdEasyITGB4BPEGFP and LentivirusFIVH1/U6copGFPITGB4BPRNAi were cotructed,packaged and amplified in packaging cells, primary cultured fibroblast from human normal skin was infected by the recombinant adenovirus pAdEasyITGB4BPEGFP,while the fibroblast isolated from human hypertrophic scar was infected by the LentivirusFIVH1/U6copGFPITGB4BP expression of MMP9,TGFβ1,and collagen I in cell culture supernatant was detected by Upregulated expression of ITGB4BP in human normal skin fibroblast could inhibit the expression of MMP9,TGFβ1,and collagenⅠ,whereas downregulated expression of ITGB4BP could promote the expression of MMP9,TGFβ1,and collagenⅠ in human hypertrophic scar ITGB4BP could play an important negative role in the process of production of MMP9,TGFβ1,and collagenⅠ.Our data suggest ITGB4BP is a new potential target in fibrosis. Key words:ITGB4BP;adenovirus;lentivirus;fibroblast 增生性瘢痕(hypertrophic scar，HTS)是机体组织受到热力或者其它形式创伤后的一种不良结局，组织学表现为成纤维细胞活化导致胶原和其它细胞外基质(extracellular matrix，ECM)分子过度沉积[1]。在引起HTS的细胞和分子机制的广泛研究中，目前公认的关键事件为处于静息状态的成纤维细胞在转化生长因子β1(traforming growth factorβ1，TGFβ1)和机械应力的作用下发生表型转化，变为表达α平滑肌肌动蛋白(smooth muscle cell αactin,αSMA)为标志物的肌成纤维细胞(myofibroblast)[2，3]。因此能控制成纤维细胞表型转化和功能变化的信号分子调节途径，是HTS形成机制研究中的焦点问题[4]。在前期实验中我们对HTS和正常皮肤内的差异表达基因进行筛选后，发现P311基因高表达于新生的HTS内[5，6]，随后利用酵母双杂交技术筛选了成人肝文库中能与P311相互作用蛋白的编码序列，经过生物信息学分析、回复性验证和激光共聚焦共定位检测后获得了一个目的基因，其编码的蛋白是：β4整合素结合蛋白(Integrin beta 4 binding protein,ITGB4BP)。因此本实验室构建了高效表达ITGB4BP的重组腺病毒真核表达载体和干扰ITGB4BP表达的RNAi慢病