素材：诱导多能干细胞技术及其应用 高二下学期生物人教版选择性必修3.docxVIP

诱导多能干细胞技术及其应用 高中生物学选择性必修三简单介绍了ips细胞诱导多能干细胞的成果与应用。 近年来，干细胞研究受到越来越多的重视，原因是干细胞具备强大的增殖潜能，经过适当诱导能定向分化为特定的组织或器官，因此在器官移植等临床医学领域具有极为重要的应用价值。 胚胎干细胞能被诱导分化为人体几乎所有种类的细胞，可以满足疾病建模、再生医学以及药物开发等方面研究的需要，但是由于胚胎干细胞的胚胎来源，相关研究存在伦理学方面的争议；而多能干细胞虽然具有分化成多种细胞组织的潜能，但是其分化能力有限，例如骨髓多能造血干细胞最多只能分化成十余种血细胞，而不能分化为造血系统以外的其他类型的细胞，且在移植后还会出现免疫排斥现象。 上述问题导致干细胞技术在临床医学上的应用一度陷入了尴尬的境地。2006年，日本学者Takahashi和Yamanaka发现，将某些基因，包括控制干细胞多能性和自我更新的相关基因(Oct4)、性别决定区Y框蛋白2基因(Sox2)、原癌基因(c—Myc)和表皮锌指因子(相关基因)(Klf4)等，导人小鼠成纤维细胞，能使它们转化成多能干细胞，为干细胞技术研究用细胞的来源开辟了新的途径。为区别于机体本身的多能干细胞，科学家把这种由诱导产生的多能干细胞称为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)。iPSCs技术不仅避免产生胚胎干细胞研究的伦理问题，而且不会发生类似自体多能干细胞分化潜能受限及移植后的免疫排斥等问题。iPSCs技术开启了干细胞治疗的新时代，将造福人类的健康事业。 1． iPSCs技术的实施步骤 iPSCs发现后旋即吸引了领域内大量科学家投身于其研究，目前已建立起一套较为成熟的iPSCs技术体系，其工作步骤主要包括：受体细胞的选择、诱导因子的筛选及优化、介导载体的选择及优化以及iPSCs的筛选及鉴定。 1．1 受体细胞的选择研究发现，机体内不同组织器官的细胞(如小鼠的B淋巴细胞、神经干细胞、肝细胞、胃表皮细胞，以及人类的纤维细胞、血液细胞、内皮细胞、骨髓细胞等)作为受体细胞，均具有被诱导而发生逆转并形成诱导多能干细胞的潜能，且这种潜能不受细胞类型及其分化阶段的影响。但同时科学家注意到，不同组织、器官来源或不同发育阶段的细胞生成iPSCs的效率和安全性却存在较大差别。例如：胃上皮细胞不具备常见的逆转录病毒整合位点，因此在病毒进入细胞后，其基因组不易被病毒整合；而神经干细胞由于自身高表达内源性的Sox2基因，从而易被诱导重编程，相对来说更合适作为受体细胞。11。由此看来，如果要成功获得iPSCs，受体细胞的筛选至关重要。由于人的血细胞(如T细胞和B细胞等)、脂肪细胞和皮肤成纤维细胞取材方便，且来源广泛，故目前常作为受体细胞用于建立“个体特异的”或“组织特异的”iPSCs。 1．2诱导因子的筛选及优化众所周知，从胚胎干细胞分化为成体细胞的过程会受到许多因子精密而复杂的调控。有研究发现，将胚胎干细胞和已无分化能力的体细胞融合后，体细胞可以被诱导而使其核基因又重启编程能力，因此科学家推测胚胎干细胞中可能存在一些对于成体细胞恢复多能性至关重要的因子。若要将受体细胞去分化使之重新逆转为iPSCs，必须筛选出合适的基因导入受体细胞。于是日本学者Yamanaka最初对胚胎干细胞中被认为与维持其多能性相关的24个候选基因逐一进行了研究，最终发现Oct4、Sox2、c—Myc和Klf4四个基因在诱导成体细胞恢复多能性方面起着至关重要的作用。随着研究的深入，不断有新的基因被发现在iPSCs诱导生成中发挥着作用，迄今被认可的这类基因约有10个。目前，科学家主要采用1个或多个基因联合作用于人或动物的各种受体细胞，来寻找诱导生成iPSCs的有效方法。 值得注意的是，有些基因会给受体细胞带来负面影响，例如细胞增殖过程中发挥正常生理作用的c-Myc具有潜在的致癌作用，将其作为外源目的基因导入受体细胞后有可能活化而产生肿瘤(有一些带有c-Myc的转基因小鼠会产生肿瘤)，不利于临床应用。因此，出于对安全性等因素的考虑，研究者须对上述基因 的选取和组合进行优化。例如，为解决c—Myc具潜在致癌作用这一问题，2008年Nakagawa和Wernig仅利用Oct4、Sox2和Klf4三个基因进行试验，成功地将鼠和人成纤维细胞诱导为iPSCs；同年，Kim提出了一种更安全的方法，他仅用Oct4及KV4便成功地使神经干细胞实现逆转。但这两种无c—Myc参与的诱导方法尽管具有一定安全性，其效率却相对低得多，为此科学家被迫寻找新的途径，目前已发现在某些特定小分子化合物辅助下，导入更少的外源基因即可高效率获得iPSCs1“，如2008年Huangfu将Oct4和Sox2与组蛋白去乙酰化酶抑制剂组合运用，成功将人成纤维