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AFLP的原理是利用PCR扩增基因组DNA限制性酶切片段。该技术的步骤为:①用两个不同的限制性内切酶消化模板DNA,然后将双链接头连接到酶切片段末端;②利用与接头序列互补的PCR引物对连接产物进行预扩增,然后再用选择性引物对预扩增产物进行选择性扩增;③利用电泳分离扩增的DNA片段。 5、扩增片段长度多态性DNA标记 Amplified Fragment Length Polymorphic DNA,AFLP 第11章现代技术病害流行学应用 “3S”技术植病流行学应用 GPS可用于病害调查和病害防治。 RS可以综合反映病害引起植物的病变程度,能够在早期并且在较大范围内对植物病害做出准确的监测。 GIS能够利用由GPS和RS获得的数据,将同一坐标系中由不同特性构成的图形相互叠加在一起,由此可以获得更多空间信息。 1、全球定位系统(GPS) GPS的组成: 空间部分 21颗工作卫星、3颗备用卫星。 控制部分 主要由地面控制站组成,可跟踪监测卫星的运行状况,计算其轨道,并将这些信息反馈给GPS卫星用于播发。 用户部分 包括GPS接受仪及外围设备,可以全天候的接收、处理和分析GPS信号,精确计算与GPS卫星之间的准确距离,从而实现快速定位。 GPS在植保中的应用,以美国尤为领先。目前美国的农场主在联合收割机、播种机和施肥机等农用机械上均安装了卫星定位仪(接受仪),以指导农业生产,实现了“精准农业”模式。 目前,我国各省植保部门的技术人员均配备了GPS仪,其主要用途是在病害考察或调查中实现定位,便于某种病害多年的定点调查,有利于研究病害历年流行动态以及更精确的病害管理。 RS的原理是接受目标物辐射或反射的不同电磁波,通过一系列处理和解释过程,快速而准确地提供被测目标的有关信息。 绿色农作物反射的光谱有一定的规律,当农作物受到病害等灾害时,叶片会出现颜色的改变、结构破坏或外形改观等病态,叶片的反射光谱有明显的改变。这就可以利用遥感技术进行病害监测、早期诊断及病害流行规律研究等。 2、遥感技术 GIS是处理地理数据的输入、输出、管理、查询、分析和辅助决策的计算机系统,通过对多因子的综合分析,可以迅速的获取满足应用需要的信息,并能以地图、图形或数据的形式表示处理结果。 利用GIS可对植物病害进行监测、预报和风险分析。 3、地理信息系统 四、数字植保技术 数字植保技术是指把植保原始数据转换成可理解的信息,这种信息包括病虫发生危害的高分辨率卫星摄像、数字地图、作物、气候、经济、社会和人口的信息。而且要建立高速网络与数字植保连接,并通过Internet实行更高层次的访问,实现植保病情数据的远程传输与采集、病虫远程诊断和防治指导。 地统计学亦称地质统计学,是以区域化变量理论为基础,以变异函数为主要工具,研究在空间分布上既有随机性又有结构性、空间相关和依赖性的自然现象和科学。 地统计学在宏观植物病理学中的应用: ①用地统计学研究病害的分布、传播; ②用基于地统计学的预测方法,预测病害发生趋势; ③应用于病害管理规划设计和实施。 二、地统计学方法 数学模型是对现实世界的一个特定对象,根据特有的内在规律,做出一些必要的假设,运用适当的数学工具,得到一个数学结构。简单的说,数学模型就是系统的某种特征本质的数学表达式。 三、数学建模技术 数学建模是利用数学方法解决实际问题的一种实践,即通过抽象、简化、假设、引进变量等处理过程后,将实际问题用数学方式表达,建立数学模型,然后运用先进的数学方法及计算机技术进行求解。 数学建模技术在宏观植物病理学研究中常用来建立植物病害预测预报模型、损失估计模型等。 四、分子生物学技术 1、等位酶(allozyme) 等位酶是由核基因编码的不同等位基因相对应的酶。等位酶技术的要求是提取具有生物活性的酶,然后根据等位酶的分子量、结构或等电点的不同将其电泳分离。分离后进行特异性酶染色以检测等位酶带谱,进而对多态性酶谱带进行遗传统计分析。 PCR技术基本原理 PCR:Polymerase chain reaction 多聚酶链式反应 DNA的体外合成条件:模板DNA,寡核苷酸引物,DNA聚合酶,合适的缓冲体系, 模拟生物过程在体外合成DNA 长产物片段与短产物片段 RAPD也称
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