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凝胶免疫电泳技术 案例 早期的电泳技术是由瑞典Svedberg教授提出了荷电的胶体颗粒在电场中移动的现象称其为电泳。Graber和Willian1953年将凝胶扩散置于直流电场中进行,首创免疫电泳技术,此方法既具有抗原抗体反应的高度特异性,又具有电泳技术的高分辨率和快速、微量等特征,因此其应用范围日益扩大 那么:什么是凝胶免疫电泳技术?该技术的检测原理是什么? 这个技术有哪几种类型?它具有什么临床价值呢? 免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产物,即可溶性抗原和抗体在直流电场的作用下,在凝胶内加速定向泳动,彼此相遇而特异性结合,在比例合适处形成可见的沉淀物 凝胶免疫电泳技术 免疫电泳技术 主要类型 1 2 3 对流免疫电泳 免疫电泳 火箭免疫电泳 4 免疫固定电泳 将双向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术 等电点 带电荷 分子量 结果 免疫球蛋白 较高 带较少的负电荷 较大 向正极的泳动速度小于向负极的电渗 免疫球蛋白泳向负极 抗原蛋白 较低 带较强的负电荷 较小 向正极的泳动速度大于向负极的电渗 抗原泳向正极 对流免疫电泳 ①Ag为阳性;② Ag为弱阳性 ③Ag为强阳性;④Ag为强阳性 对流免疫电泳 无沉淀线出现表明无相应的抗原 沉淀线位于抗原抗体孔中间,说明两者比例较适合 沉淀线偏向抗原孔一方,表示抗体浓度>抗原,反之,则是抗体浓度<抗原浓度 固定抗体不移动,抗原向正极泳动。随着抗原量减少,基底区越来越窄 形成的沉淀线逐渐变窄,形成一个如火箭的沉淀峰,峰的高度与抗原量呈正相关 火箭免疫电泳图(①②③④为标准抗原;⑤⑥为标本) - + 火箭免疫电泳技术 单向免疫扩散与电泳相结合的定量检测技术,实质上是加速的单向扩散试验 免疫电泳技术 将区带电泳与双向琼脂扩散相结合的一种免疫分析技术 SP G A M κ λ SP G A M κ λ SP G A M κ λ 免疫固定电泳技术 将区带电泳与沉淀反应相结合的一种免疫化学分析技术 对流免疫电泳和火箭免疫电泳目前已不推荐使用 免疫电泳结果较难分析,少用 免疫固定电泳分辨力强,敏感度高 最常用于血清中M蛋白的鉴定与分型 1 2 3 临床应用
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