药物分析课件版 第四章 药物的含量测定方法与验证.pptVIP

3、含量测定 含量测定目的是得到供试品中被分析物的含量或效价的准确结果。 在杂质可获得的情况下，对于主成分含量测定可在供试品中加入杂质或辅料，考察测定结果是否受干扰，并与未加杂质和辅料的供试品比较测定结果。 * 第三节 药品质量标准分析方法验证 3、含量测定 在杂质或降解产物不能获得的情况下，可采用另一个经验证了的或药典方法进行比较，对比两种方法测定的结果。 也可采用破坏性试验（强光照射，高温，高湿，酸、碱水解及氧化），得到含有杂质或降解产物的试样，用两种方法进行含量测定，比较测定结果。必要时进行色谱峰纯度检查，证明含量测定成分的色谱峰中不包含其他成分。 * 三、专属性 专属性验证常见主要问题： 验证方法不科学。主要是破坏性试验条件选择不合理，往往出现破坏条件太剧烈或使用破坏条件无效。 破坏条件选择参考标准：能出现杂质峰，主成分峰的峰面积约相当于破坏前的80～90％，并能与产生的杂质峰很好的分离。 * 四、检测限 检测限系指试样中的被分析物能够被检测到的最低量，但不一定要准确定量。 该验证指标的意义在于考察方法是否具备灵敏的检测能力。因此对杂质限度试验，需证明方法具有足够低的检测限，以保证检出需控制的杂质。 药品的鉴别试验和杂质检查方法，均应通过测试确定方法的检测限。常用的方法如下: * 四、检测限 1．非仪器分析目视法（直观法 ） 检测限的测定是通过对一系列已知浓度被测物的试样进行分析，并以能准确、可靠检测被测物的最小量或最低浓度来建立。用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。 * 四、检测限 2．信噪比法（S/N） 用于能显示基线噪音的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与噪声信号进行比较，计算可检出的最低浓度或量。一般以信噪比为3：1或2：1时相应的浓度或注入仪器的量确定检测限。 其他方法有基于工作曲线的斜率和响应的标准偏差进行计算的方法等。 无论用何种方法，均应用一定数量的试样，其浓度为近于或等于检测限，进行分析，以可靠地测定检测限。 * 五、定量限 定量限系指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。 定量限体现了分析方法是否具备灵敏的定量检测能力。杂质定量试验，需考察方法的定量限，以保证含有很少的杂质能够被准确测出。 杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。 常用信噪比法确定定量限。一般以信噪比为10∶1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。 * 五、定量限 1、直观法 直观评价可以用于非仪器分析方法，也可用于仪器分析方法。 定量限一般通过对一系列含有已知浓度被测物的试样进行分析，在准确度和精密度都符合要求的情况下，来确定被测物能被定量的最小量。 * 五、定量限 2、信噪比法（S/N） 用于能显示基线噪音的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与噪声信号进行比较，计算出可检出的最低浓度或量。一般可信噪比为10：1。 其他方法有基于工作曲线的斜率和响应的标准偏差进行计算的方法等。 无论用何种方法，均应用一定数量的试样，其浓度为近于或等于定量限，进行分析，以可靠地测定定量限。 * 六、线性 线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。 应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列供试样品的方法进行测定，至少制备5份供试样品。以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。 * 在一定浓度范围待测物浓度与响应值成线性关系 线性关系方程：Y=a+bx 线性程度：相关系数 （r=0.9999) 七、范围 范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。 范围应根据剂型和分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。 1、原料药和制剂含量测定，范围应为测试浓度的80%～120%； * 七、范围 2、制剂含量均匀度检查，范围应为测试浓度的70%～130%； 3、溶出度的溶出量测定，范围应为限度的±20%， 4、释放度中如规定了限度范围，则应为下限的-20%至上限的＋20%； 5、杂质测定范围应根据初步实测，拟订为规定限度的±20%。 如果含量测定与杂质检查同时用百分归一化法，则线性范围应为杂质规定限度的-20%至含量限度（或上限）的＋20%。 * 八、耐用性 耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为把方法用于常规检验提供依据。开始研究分析方法时就应考虑其耐用性。如果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明。 耐用性主要考察方法本身对于可变试验因素的抗干扰能力。 * 八、耐用性 典型的变动因素有： 1、被测溶液的稳定性，样品的提取次数、时间