药物分析课件ppt 第十一章 抗生素类药物的分析.pptVIP

第十一章 抗生素类药物分析;『本章学习要求』1. 了解抗生素类药物分析的特点。2. 了解β-内酰胺类抗生素的结构和性质，熟悉 β-内酰胺类抗生素的鉴别试验、特殊杂质检查方法，掌握β-内酰胺类抗生素的含量测定方法。3. 了解硫酸链霉素和硫酸庆大霉素的结构和性质，掌握硫酸链霉素和硫酸庆大霉素的鉴别试验、特殊杂质检查和组分分析方法。4、熟悉抗生素类药物中高分子杂质的控制方法。;一、抗生素的概念及特点;二、抗生素类药物的质量分析;（二）检查;（三）含量测定或效价测定;2、物理化学法 High-performance liquid chromatography HPLC Liquid chromatography-Mass spectrometry LC-MS UV 容量法 准确可靠、专属性高、操作简单、省时、样品用量少;抗生素的分类;第二节 β-内酰胺类抗生素的分析;青霉素;氨苄西林（氨苄青霉素）;阿莫西林（羟氨苄青霉素）;普鲁卡因青霉素;头孢氨苄;头孢羟氨苄;理化性质;酸性;与有机碱(普鲁卡因)成盐 ;; ;（四）β–内酰胺环 ;青霉素类;青霉素的降解途径;青霉素的降解产物;色谱法;光谱法;（三）显色反应;茚三酮和双缩脲反应; 与重氮苯磺酸反应; K+、Na+的火焰反应;;分离度的计算公式:;定量方法：1、主成分自身对照法；2、面积归一化法；3、限量法；4、自身对照外标法;自身对照外标法： 利用特定条件下β-内酰胺类抗生素可以缔合成与高分子杂质有相似色谱行为的缔合物，在Kav＝0处表现为单一的色谱峰。以药物自身为对照品，测定其在特定条件下缔合时的峰响应指标，然后改变色谱条件，测定样品，记录样品色谱图中Kav＝0处的高分子杂质峰的响应指标，按外标法计算，即得样品中高分子杂质相当于药物本身的相对含量。; 1.头孢他啶聚合物的测定 固定相：葡聚糖凝胶G-10（ 40~120μm ） 流动相A：3.5%硫酸铵的0.01mol/L磷酸盐缓冲液 流动相B：水 对照品溶液：头孢他啶对照品 100μg/ml;1）系统适用性试验：理论塔板数和拖尾因子用1mg/ml蓝色葡聚糖2000、流动相A测定；重复性用对照品溶液、流动相B测定。 N不低于900，拖尾因子小于2，峰面积的RSD应小于5.0%。2）测定??法  进样供试液，用流动相A；进样对照液，用流动相B。以外标法计算，含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得超过0.3%。;2.头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查 固定相：ODS 流动相：0.2mol/L磷酸二氢铵-甲醇（62:38） 1）头孢呋辛酯异构体的制备： 对照品降解 2）系统适用性试验：各异构体之间的R1.5，以 头孢呋辛酯A异构体计算n1500。; 3）异构体：  相对保留时间 1--被测物  2--标准物 异构体 相对保留时间 判断 B异构体 0.85 供试液谱图中A异构体的峰面积 A异构体 1.0 与A、B异构体峰面积和之比应 为0.48~0.55。 ; 青霉素钠（钾）的吸收度检查： 供试液 1.80mg/ml， 结果判断：A280不得大于0.10;高效液相色谱法 原理：利用青霉素类抗生素在一定条件下在反相硅胶上的保留行为的不同而实现高效分离，并与标准品相对照，而对其进行定量的一种方法。 优化色谱分析条件 （1）Column -CN ODS C18 C8 -Ben （2）mobile phase/flow rate （3）column temperature （4）detection wavelength （5）workstation sample preparation;实验注意事项 （1）色谱峰要达到较好的分离－基线分离(base separation) （2）需要标准品对照，用外标法定量 （3）可同时测定多个组分的含量 （4）需要排除制剂中辅料等杂质对测定的干扰;第三节 氨基糖苷类抗生素;;链霉素：;;;绛红糖胺;庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 　庆大