药物分析课件7淀粉及纤维素类固定相.pptVIP

Chiral Pharmaceutical Separation ——淀粉及纤维素类手性固定相 纤维素手性固定相 1938年，乳糖填充色谱柱分离外消旋樟脑衍生物 1944年，Prelog Wicland在90cm的乳糖色谱柱上分离了生物碱对映体 偶然观察到在纸色谱上外消旋氨基酸被分成两个点，认识到纤维素对映体的拆分能力，Dalgliesh于1952年提出了“三点相互作用”理论 1973年，Hesse Hagel发现微晶纤维素三乙酯（CTA）具有很高的手性识别能力 Okamoto研究组成功开发了一系列纤维素和直链淀粉衍生物CSP 纤维素衍生化 天然纤维素溶解度低，非刚性，不适于做CSP，微晶纤维素 衍生化后可以降低其极性，提高对映体选择性 通过酰氯化合物和异氰酸酯与葡萄糖单元的-OH反应，得到纤维素酯类和纤维素苯基氨基甲酸酯类固定相 纤维素酯类CSP：纤维素三乙酯、纤维素三苯甲酸酯，纤维素-三（4-甲基苯甲酸酯）和纤维素-三（肉桂酸酯） 纤维素-三乙酸酯CSP （OA） 1973年，Hesse Hagel发现微晶纤维素三乙酸酯表现出高度的手性识别能力，可以实现非极性化合物，芳香类对映体的拆分 柱容量高，适于制备分离 微晶纤维素在苯中进行多相乙酰化得到的衍生物涂覆于硅胶载体上得到CTA固定相 具有柱效高，寿命长的特点 手性拆分能力通过选择涂覆溶剂优化：CH2Cl2CH2Cl2-CF3COOHCH2Cl2-苯酚 纤维素-三苯甲酸酯CSP（OB） 具有优良的手性选择性，适合于手性亚砜的分离 吸附位点在羰基和苯基，被分析化合物手性中心附近的羰基，氨基，羟基可参与氢键作用 苯环上取代基的种类和位置对CSP手性识别能力影响较大：诱导效应影响手性选择性，推电子基（-CH3）比吸电子基（-F，-Cl）具有更强的手性识别能力 纤维素-三（苯甲酸酯）CSP的制备 纤维素-三（4-甲基苯基甲酸酯）CSP（OJ） CTB固定相上取代基的类型，数目和位置对光学拆分具有一定影响，斥电子取代基增加了纤维素三苯酯衍生物羰基氧上的电子云密度，比吸电子取代基具有更强的手性识别能力 微晶纤维素与4-甲基苯甲酰氯反应，得到纤维素-三（4-甲基甲酸酯），涂覆在氨丙基硅胶上制成CTMB类手性固定相： 手性识别的吸附位置为氨基甲酸酯，其极性受到苯基取代基的类型，位置和数量的影响 苯环上的-OCH3和-NO2取代会降低CSP的手性识别能力，而取代异丙氧基则会增强手性选择性 可以在反相条件下进行对映体拆分 苯环上的取代基衍生物通常表现出更高的手性识别能力 推电子取代基会使羰基电子云密度增加，而吸电子基的引入则会令-NH活性变得更高 外消旋体的极性增加，会增强其与CSP间的氢键作用，增加选择性 淀粉手性固定相 相对纤维素而言，淀粉更适用于极性芳香族化合物的分离 其手性CSP多为其衍生物：直链淀粉-三（苯基氨基甲酸酯）（ATPC），直链淀粉-三（3,5二甲基苯基氨基甲酸酯）（ADMPC），支链淀粉-三（苯基氨基甲酸酯）（APTPC），支链淀粉-三（苯基甲酸酯）（APTB） 先将淀粉与带有相应功能团的苯甲酰氯或苯基异氰酸酯化合物反应，得到淀粉衍生物，再将其涂覆在氨丙基硅胶上，得到淀粉类的手性CSP 直链淀粉-三（苯基氨基甲酸酯）CSP（AS） 直链淀粉与异氰酸苯酯反应，得到直链淀粉-三（苯基甲酸酯）衍生物，涂覆在氨丙基硅胶上，得到ATPC手性固定相： 商品化手性色谱柱 四种主要手性柱 四种主要手性色谱柱 第二代手性色谱柱 H 系列手性柱 特性 1) 5 微米硅胶用于获得高的理论塔板数 2) 适用于痕量分析 3) 采用150 mm长的手性柱可节省分析时间 AS vs. AS-H (中性组分) AS vs. AS-H (碱性组分) AS vs. AS-H (酸性组分) OJ vs.OJ-H (痕量分析) ?柱尺寸 ： 250 × 4.6 mm I.D. ?样品： 1-Phenyl ethanol ?条件 流动相 ： 正已烷 / 异丙醇 ＝ 90 / 10 温度 ： 25 °C 流量 ： 1.0 ml/min. 检测波长 ： UV 254nm AD vs. AD-H (痕量分析) CHIRALPAK? IA与IB产生背景 CHIRALPAK? IA, IB 的基本特征 CHIRALPAK? IA分离实例---中性样品 CHIRALPAK? IA分离实例---碱性样品 CHIRALPAK? IA分离实例---酸性样品 CHIRALPAK? IB分离实例---中性样品 四种主要手性柱： 　AD-H?OD-H?AS-H?OJ-H 完全分离的样品数 ：388 (2000-2002 数据) 主要的四种手