药物分析 第06 章芳酸类非甾体抗炎药物的分析.pptVIP

（一）直接紫外分光光度法 贝诺酯的测定： 原料药：对照品比较法 片 剂：吸收系数法 丙磺舒　ChP（2005） 　　取本品10片，精密称定，研细，精密称取适 量（约相当于丙磺舒60mg），置200ml量瓶中， 加乙醇150ml与盐酸溶液（9→100）4ml，置 70℃水浴上加热30分钟，放冷，用乙醇稀释至刻 度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9→100）2ml，用乙醇 稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在249nm波 长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数 （ 　）为338计算，即得。 计算： （二）柱分配色谱-紫外分光光度法 玻璃棉 供试品液：CHCl3-HCl ①中/碱性杂质先洗脱 ③?max=280nm，Aspirin(mg)=C(Au/As) 硅藻土-NaHCO3 洗脱液2：冰HAc-CHCl3 10ml 洗脱液3：冰HAc-CHCl3 85ml ②Aspirin后洗脱 USP(37)采用此法同时测定Aspirin胶囊中 Aspirin和SA 200~300mm 60mm 4mm 22mm 层析柱 玻棉 三、高效液相色谱法 HPLC ChP(2015)：阿司匹林肠溶胶囊、泡腾片、栓剂等含量测定采用此法 阿司匹林栓剂的含量测定 色谱条件：色谱柱C18；流动相为乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(20:5:5:70);检测波长276nm 系统适用性试验：n＞3000; Aspirin与水杨酸钠 的R＞ 1.5 计算： 色谱流出曲线 A E G F H 进样 空气峰 C I D J t B 信号 O 0 二、色谱法的基本术语 名词术语：基线、色谱峰；峰高h、峰面积A；峰宽W、半峰宽W1/2、标准偏差σ 空气峰 色谱系统的适用性试验通常包括：理论板数、分离度、重复性和拖尾因子等四个指标。 （1）理论板数—评价色谱柱柱效的一个指标。n＝5.54（ tR / Wh/2）2 色谱柱的理论板数越多，柱效越高 （2）分离度（R）--R=2（tR1-tR2）/（W1+W2） ，除另有规定外，定量分析时分离度应大于1.5。 （3）重复性—取对照连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0％。 （4）拖尾因子（T）--保证分离效果和测量精度。T=W0.05h/2d1 峰高法定量时T应在0.95～1.05之间 系统适用性试验 一、血清中Aspirin和SA的HPLC（HPLC-UV法） 色谱条件： 色谱柱为ODS-C18(150mm × 4.6mm, 5μm) 流动相为甲醇-水-正丁醇-磷酸(300 :200 :10：0.05) 检测波长为237nm；内标物为苯甲酸 血清样品预处理 血清100μl + HClO450μl + 不同浓度Aspirin和SA + 内标液 涡旋混合2min 离心5min 取上清液20 μl进样。 体内药物分析 回归方程：以峰高比（H标/H内）对浓度回归 Aspirin的回归方程：Y =5.8×10-3 +5.29×10-2X r= 0.9996 SA的回归方程：Y = 6.0×10-3 + 8.33×10-2X r = 0.9981 Aspirin和SA的线性范围分别为：1～20μg/ml; 2～30μg/ml 回收率：空白血清 + 五种不同浓度测定， Aspirin为96.0%～106.0%; SA为92.0%～119.5%;（五种不同浓度均应在线性范围内） 一、血清中Aspirin和SA的HPLC 色谱条件：色谱柱为LiChrospher100RP(125mm×4mm, 5μm) 流动相为25%乙腈溶液-醋酸缓冲溶液梯度洗脱。 检测波长为254nm；内标物为依他尼酸。 尿样品预处理：C8固相萃取柱，100mg填料/ml用甲醇1.0ml,然后用0.5ml蒸馏水活化。 2.0ml尿样 + 内标300μl(10μg/ml) 上柱 1.0ml水洗 脱生物杂质 再用甲醇0.5ml洗脱保留在柱上的丙磺舒和内标。洗脱液0.45μm浸滤膜滤过，取5μl直接进样分析。 线性关系和回收率： 取空白尿样2.0ml +不同浓度丙磺舒+内标液，按 上述方法分析(浓度范围为0.1μg/ml～100μg/ml) A丙/A内对C丙回归。 回收率： 丙磺舒为100%±3%(n=14)； 内标为101%±3%(n=12)； 人尿样测定：丙磺