蛋白质等电点的测定.pptVIP

核糖核酸酶可逆变性 在强烈沉淀条件下，蛋白质胶体溶液的稳定性、蛋白质分子结构和性质均被破坏，沉淀不能重新溶解于水。 由于沉淀过程发生了蛋白质的结构和性质的变化，所以是变性沉淀。 加热沉淀、强酸碱沉淀、重金属盐沉淀、生物碱沉淀等都属于不可逆沉淀。 蛋白质的变性沉淀 盐析 电泳 透析 层析 分子筛 超速离心 2）蛋白质的分离纯化方法 定 义：加入大量中性盐以破坏Pr的稳定因素并 使从溶液中沉淀析出的现象。 原 理：破坏Pr两个稳定因素：水化膜和电荷层。 中性盐：(NH4)2SO4；Na2SO4；NaCl等。 优 点：Pr不变性，常用。 ① 盐析（Salting out) 定义：带电粒子在电场力作用下向着所带电荷相 反方向泳动的现象叫电泳。 原理： ● Pr分子在溶液中可带净负电荷或净正电荷，可在电场中移动。 ● 不同Pr分子携带电荷量不同，分子大小也 不同，故在电场中泳动速度不同，可彼此分离。 ② 电泳（electrophoresis) 电场中，带净电荷Q的粒子所受电荷引力： 溶液中，运动粒子与溶液之间存在阻力F阻： 当F引=F阻时： ● 粒子泳动速度V与场强E、粒子电量Q成正比； ● V与粒子半径r、溶液粘度η成反比； ● V与粒子形状有关。 非球形分子（如线状DNA）在电泳过程中受到更