蛋白质样品的制备.pptVIP

沉淀能否发生； 沉淀剂或沉淀条件下对活性结构是否有破坏作用； 沉淀剂是否容易除去； 用于食品、医药产品的沉淀剂是否对人体有害。 沉淀过程应考虑的问题： 沉淀技术分离生化产物的典型例子是蛋白质的分离提取 优点：设备简单、成本低、原材料易得、 便于小批量生产； 缺点：所得沉淀物可能聚集有多种物质， 或含有大量的盐类，或包裹着溶剂， 产品纯度常比结晶法低， 过滤也较困难。 eg. 从血浆中通过5步沉淀生产纯度高达99%的免疫球蛋白和96%~99%的白蛋白。 图1 利用蛋白质沉淀大规模提纯白蛋白与免疫球蛋白的工艺流程图 沉淀法分离蛋白质的特点： 生产前期可使原料液体体积很快减小10~50倍，从而简化生产工艺、降低生产费用； 使中间产物保持在一个中性温和的环境； 可及早将目标蛋白从其与蛋白水解酶混合液中分离出来，避免蛋白质的降解，提高产物稳定性； 用蛋白质沉淀法作为色谱分离的前处理技术，可使色谱分离使用的限制因素降低到最少。 §3.2 蛋白质的溶解特性 蛋白质的溶解行为是一个独特的性质，由其组成、构象以及分子周围的环境所决定。 蛋白质在自然环境中通常是可溶的，所以其大部分是亲水的，但其内部大部分是疏