罗氏试剂盒说明书 HIV combi PT_en-t.docVIP

HIV combi PT（草本） HIV-1抗原和HIV-1及HIV-2总抗体 05863872001V1 HIV combi PT（草本） HIV-1抗原和HIV-1及HIV-2总抗体 Elecsys和cobas e分析仪 PAGE 4/ NUMPAGES 6 2010-07，V1 中文（草本） 2010-07，V1 中文（草本） PAGE 3/ NUMPAGES 6 Elecsys和cobas e分析仪 190 100次测试 ● 试剂盒适用的分析仪 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 ● ● ● ● ● 中文 主要用途 用于体外定性免疫测定人血清和血浆中的HIV-1 p24 抗原以及HIV-1（包括O组）和HIV-2抗体。 电化学发光免疫测定“ECLIA”供在Elecsys和cobas e免疫测定分析仪上使用。 监管审批 Elecsys HIV combi PT测定依照指令98/79/EC获得CE认证。已通过认证机构依照通用技术规格（CTS），对本测定用于诊断用途和献血筛查的测试性能加以确立和验证。 概要 人免疫缺陷病毒（HIV），即获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的病原体，属于逆转录病毒家族。HIV的传播途径包括血液和血制品受污染、性接触或在孕前、孕期和孕后的HIV感染母婴传播。 迄今识别出了两种人免疫缺陷病毒，即HIV-1和HIV-2。 1、2、3、4 在现已记述的已知HIV病毒的多种亚型中，每种的地域分布都有所不同。HIV-1分为3种关系较远的组别：M组（主要组），N组（非M非O组）和O组（外围组）。5、6根据其基因关系，在HIV-1 M组里已识别出至少9种不同的亚型（A－D，F－H，J，K）。7 包含2个或更多不同亚型序列的重组HIV-1病毒是存在的，且呈大范围流行。 通常在感染后的6-12周后，可在血清中发现代表存在HIV感染的HIV蛋白抗体。8、9由于免疫显性抗原决定簇亚单位的抗原决定基的免疫原性序列不同， 特别是包膜蛋白HIV-1 M组、HIV-1 O组和HIV-2， 因此需要特异性抗原来避免免疫测定对HIV感染检测的失败。9、10 通过检测近期感染高病毒载量病人血样的HIV-1 p24抗原，可比传统抗体测定约提前6天检测出HIV感染。11、12可使用第4代HIV测定同时检测出抗HIV抗体和HIV-1 p24抗原。这一方法会使灵敏度升高，因此其诊断时限比抗HIV测定要短。13、14 采用Elecsys HIV combi PT测定可在一次测定中同时检测出HIV-1 p24抗原以及HIV-1和HIV-2抗体。该测定使用源自HIV-1（包括O组）和HIV-2的env区和pol区的重组抗原来检测HIV特异性抗体。使用特异性单克隆抗体来检测HIV-1 p24抗原。Elecsys HIV combi PT测定不可取代独立的HIV抗原测定。必须用推荐的验证算法对重复反应性样本加以验证。 验证测试包括Western Blot和HIV RNA测试。 检测原理 夹层双抗体夹心原理。测定总时长：27分钟。 ● 第1次孵育：用清洁剂预处理液处理40 μL的样本。 ● 第2次孵育：生物素化单克隆抗p24抗体/HIV特异性重组抗原/HIV特异性肽，和带标记钌复化合物标记a的单克隆抗p24抗体/HIV-特异性重组抗原/HIV特异性肽发生反应，形成夹层化合物双抗体夹心复合物。 ● 第3次孵育：在加入包覆包被链霉亲和素的微粒后，通过生物素和链霉亲和素的相互作用特异性亲和作用让复化合物结合为至固相。 ● 把反应混合物吸入测量元件测量池，通过磁力磁场把微粒吸附到电极表面。用ProCell去除未结合物质。 在为电极通电后产生化学发光，由可用光电倍增管检测测量信号。 ● Elecsys 软件通过比较样本的电化学发光信号和之前在HIV combi PT定标中得到的临界值，自动测定结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy){}三联吡啶钌 a) 三羟甲基氨基甲烷(2,2’-联吡啶) 钌(II)-化合物 (Ru(bpy)32+ ) 试剂—工作溶液 M 包覆包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明盖），1瓶，6.5 mL： 包覆包被链霉亲和素的磁珠微粒0.72 mg/mL；防腐剂。 R0 MES缓冲液50 mmol/L，pH值5.5；1.5 % Nonidet P40；防腐剂（白盖），