红细胞血型检测.pptxVIP

红细胞血型检测目 录第七节 吸收放散试验技术第八节 凝集抑制试验技术第九节 红细胞血型分子生物学检测第一节 输血前免疫血液学检查重点提示ABO血型与RhD血型鉴定不规则抗体得筛查与鉴定交叉配血试验ABO血型与RhD血型鉴定原理:利用抗原与抗体之间特异性结合得凝集反应来完成。ABO血型鉴定:正定型、反定型。 正定型,检测红细胞表面就是否存在A抗原与(或)B抗原;反定型,检测血清中就是否存在抗-A／抗-B抗体(凝集素)。RhD血型鉴定:红细胞上存在D抗原时,可与抗-D分型血清产生特异性得抗原抗体反应,出现红细胞凝集为RhD阳性,不凝集者为RhD阴性。不规则抗体得筛查与鉴定不符合ABO血型系统Landsteiner法则得血型抗体,即抗-A、抗-B之外得血型抗体ABO系统中得亚型,变异型得抗-A1或某种抗-B等抗体包括同种抗体与自身抗体实验方法:盐水介质法、白蛋白介质法、低离子强度介质法(LISS)、酶技术、抗球蛋白试验、凝聚胺(polybrene)促凝技术与凝胶试验(Gel test)等交叉配血试验1、 主侧交叉配血:受血者血清(浆)与供者红细胞反应,检测受血者体内就是否存在针对供者红细胞得抗体。2、 次侧交叉配血:受血者红细胞与供者血清(浆)反应,检测供者血液中就是否存在针对受血者红细胞得抗体。3、 自身对照:受血者红细胞与自身血清(浆)反应,以排除自身抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假凝集等干扰试验结果得因素。第二节 盐水介质试验技术重点提示实验原理实验方法结果判读实验原理在盐水介质(saline medium)中,IgM类天然抗体分子链较长可直接与含有相应抗原得红细胞结合,并呈现肉眼可见得凝集。仅能检出IgM类抗体,无法检出IgG类抗体。实验方法平板法 应用于常规ABO血型与RhD抗原定型,易出现假阳性或假阴性结果。试管法 定型试验或半定量试验,如测定抗体效价,结果准确、可靠。大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静结果判读阳性结果 红细胞出现凝集反应或溶血阴性结果 红细胞呈游离得混悬状态溶血 阳性结果第三节 酶介质试验技术重点提示实验原理实验方法实验原理作用于红细胞表面得多糖链,减少红细胞表面负电荷,缩短细胞间距,增强IgG抗体与红细胞表面抗原得凝集反应改变红细胞表面结构,暴露出某些隐蔽抗原,使IgG类不完全抗体可以与酶处理得红细胞在盐水介质中发生凝集反应实验原理常用:木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶Rh、Kidd血型系统得检出效果最好对M、N、S、s、Fya、Fyb抗原破坏较显著实验方法一步法 在血清与红细胞反应体系中直接加入酶液促进抗体与相应红细胞反应,敏感性较差二步法 用酶液消化红细胞后,洗涤去净酶液,增强红细胞抗原性,使不完全抗体与之发生反应,出现特异性凝集结果判读阳性对照管凝集,阴性对照管不凝集,被检管出现凝集为阳性,不出现凝集判定为阴性。阳性对照管不凝集或(与)阴性对照管出现凝集,试验失败。分析原因,重新试验。第四节 凝聚胺介质试验技术重点提示实验原理实验方法实验原理凝聚胺就是一种高价阳离子季铵盐多聚物,可中与红细胞表面得负电荷,引起正常红细胞可逆性得非特异性聚集。加入柠檬酸重悬液(中与液)后,仅由凝聚胺引起得非特异性聚集会因电荷中与而消失灵敏度高,可检出IgM与IgG类抗体实验方法两步:红细胞去电荷、红细胞复电荷无抗体致敏得红细胞可在试验过程中产生可逆得非特异性凝集,抗体致敏得红细胞产生得凝集则不可逆试剂:低离子介质、凝聚胺溶液、重悬液第五节 抗人球蛋白试验技术重点提示实验原理实验方法临床应用实验原理大部分IgG抗体与具有相应抗原得红细胞在盐水介质中能够特异性结合,但不发生肉眼可见得凝集反应,该类抗体称为不完全抗体抗球蛋白分子得Fab片段可与包被在红细胞上得球蛋白分子得Fc片段结合,从而通过抗球蛋白分子得搭桥作用使不完全抗体与具有相应抗原得红细胞产生肉眼可见得凝集反应实验方法经典得血清学试验方法,主要用于检测IgG、IgA等抗体参与得抗原-抗体反应,也可测定补体组分C3、C4片段参与得免疫反应。直接抗球蛋白试验与间接抗球蛋白试验DAT用于检测在患者体内致敏红细胞得不完全抗体与(或)补体。IAT用于检测血清中得不完全抗体,即在体外将人血清与红细胞致敏,再与抗球蛋白试剂反应。临床应用DAT:胎母血型不合新生儿溶血病得诊断、免疫溶血性输血反应得调查、自身免疫性溶血性贫血得诊断及药物诱发型溶血病得诊断IAT:血型鉴定、交叉配血、器官移植、妊娠所致免疫性血型抗体以及自身免疫性血型抗体得检出与鉴定第六节 微柱凝胶介质试验技术重点提示实验原理适用范围优点实验原理分子筛技术与免疫学技术相结合得产物游离红细胞与凝集红细胞就是否能通过特殊结构得凝胶介质,从而使不同状态得红细胞得以分离阴性反应 离心力作用下,未与抗体结合得游