果蔬细胞膜渗透率的测定.pdfVIP

果蔬细胞膜渗透率的测定 一、目的要求 了解细胞膜渗透率的意义，学习果蔬组织细胞膜渗透率的测定原理和方法。 二、基本原理 果蔬细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。细胞膜具有 选择透过性功能，果蔬细胞之间以及细胞与外界环境之间发生的一切物质交换都 必须通过质膜进行。果蔬组织后熟衰老过程中，细胞质膜功能活性下降，膜通透 性增加，出现细胞内电解质向外渗漏。果蔬组织在受到不良环境胁迫时，如高温、 测 低温、振荡伤害或病原菌侵染时，细胞膜完整性和功能也会遭到不同程度的损伤， 往往表现为膜透性增加和电解质外渗 （主要是钾离子），速度加快。 检 果蔬组织细胞膜受损伤后，细胞膜内电解质外渗，会引起提取液的电导率增 加。通过测定果蔬组织浸提液或外渗液的电导率，可以了解果蔬细胞膜通透性变 质 化，反映果蔬抗逆性强弱或受到伤害的程度。一般利用相对电导率表示细胞膜渗 透率以及细胞膜受到伤害的程度。 相对电导率 （Le）为测试材料活组织提取液的电导率 （L ）与被杀死后提取 液 1 液的电导率 （L ）的百分比，即： 海 0 Le (%) (L /L )100 测 1 0 通过煮沸杀死果蔬活组织时，果蔬细胞完全破坏，细胞内电解质完全进入浸 上 检 提液，因此，Le 实际表示在一定时间内，细胞内电解质渗出量占总电解质的百 分比。 质 三、材料、仪器及试剂 （一）材料 液 叶片或果蔬组织，取样部分要避免损伤。 （二）仪器及用具 电导率仪、电子天平、真空干燥器、真空泵、真空压力表、恒温水浴锅、小 测 海 烧杯 （100mL）、大试管、带十字头玻璃棒、不锈钢打孔器、单面刀片、摇床。 四、实验步骤 检 （一）取样上 对于蔬菜，选取一定部位上生长龄相似的叶子，剪下后，先用纱布拭净，再 用打孔器打取相同大小 （直径8mm）的圆片，称取2.0g 叶肉圆片 （要求各样品 质 的圆片数目相同）。 对于果实，用打孔器打取果实 （果肉或果皮）组织后，用锋利的刀片将果实 液 组织切成相同厚度 （2mm）的薄片，要求均匀一致，尽量减少损伤。称取相同 重量 （相同数目）的果实圆片。 海 将圆片置于小烧杯中，加入20mL 去离子水浸泡、振荡10min，将水倾去， 再用去离子水冲洗3 次，最后用干净滤纸吸干圆片上的水分。 （二）测定过程 上 将组织圆片放入大试管中，并用玻棒或干净尼龙网压住，准确加入20.0mL 去离子水，浸没叶片，放入到真空干燥器。真空干燥器连接上真空表和真空泵