生物化学参考第三节 蛋白质的分子结构.pptVIP

第三节. 蛋白质的分子结构(P66) 蛋白质是复杂的大分子，其结构复杂，具有三维空间结构。根据蛋白质肽链折叠的方式与复杂的程度将蛋白质的分子结构分为四级，即一级结构和空间结构（包括二，三，四级结构）。 一. 蛋白质的一级结构（primary structure） 蛋白质的一级结构又称共价结构或者基本结构，蛋白质是由氨基酸组成的高分子有机化合物（前面讲过蛋白质的基本组成单位是氨基酸），不同的蛋白质的氨基酸的种类、数量和排列顺序不相同，导致了蛋白质结构的复杂性和生物学功能的多样性。 正是因为氨基酸的种类、数量和排列顺序不相同导致了蛋白质结构的复杂性和生物学功能的多样性，所以蛋白质的一级结构要讨论的中心问题是： 1)???? 蛋白质分子中氨基酸之间是怎样连接的? 2)???? 每种蛋白质是否有确定的氨基酸排列顺序? (一)、肽链和肽键 peptide chain and peptide bond 肽键（peptide bond）：是蛋白质分子中基本的化学键，是由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基缩合脱水而成的。 现在公认蛋白质分子中氨基酸连接的基本方式是肽键，这主要有下列实验证据： 第一，蛋白质分子中游离的α-氨基和α-羧基很少，但在蛋白质水解过程中游离的 α-氨基和α-羧基以等摩尔数的数值增加，这表明氨基酸中α-氨基和α-羧基在构成蛋白质时，参与某种结合；而当蛋白质水解时，这种结合又断开，从而形成新的α-氨基和α-羧基。 第二，某种人工合成的多肽能被蛋白酶水解，更进一步还发现，同样这些蛋白酶不但能水解肽键，而且能催化其逆反应，即在氨基酸和多肽之间形成肽键。 第三，包含肽键结构的化合物如双缩脲（biuret） H2N-CO-HN-CO-NH2能与天然硫酸铜-氢氧化钠溶液产生双缩脲颜色反应，天然蛋白质也有同样的反应。-----蛋白质显色和定量。 第四，人工合成的多聚氨基酸的X射线衍射图案和红外吸收光谱与天然的纤维状蛋白质十分相似。 第五，我国在世界上首次人工合成蛋白质----结晶牛胰岛素的成功，完全证明了蛋白质肽链结构学说的正确性。 所以，蛋白质分子是由氨基酸组成的，氨基酸彼此直接通过肽键相连。 那么肽及肽链的概念又是怎么样的呢? 肽：指氨基酸通过肽键相连而成的化合物。由两个氨基酸组成的肽称为二肽，三个氨基酸组成的肽称为三肽。依此类推，一般地把十个氨基酸以下组成的肽称为寡肽（oligopeptide），十个氨基酸以上组成的肽称为多肽或者多肽链（polypeptide）其结构为： 规则(P67) 1）、书写格式从N到C。 2）、蛋白质和肽的命名从N到C。 3）、体内多肽或蛋白质合成的过程从N到C。 举例：Ala-Gly-Ser，Ser-Gly-Ala; Gly-Ser-Ala， Ser-Ala -Gly 同是三种氨基酸组成的三肽，但若排列顺序不同，则组成不同的三肽。所以20种氨基酸可以构成许多种蛋白质。 4) 、主链与侧链 上述重复内容： 1)蛋白质N含量： 16% 2)氨基酸结构特点 3)氨基酸分类 4)氨基酸分类与分析要求掌握哪几种方法 ？ 5)蛋白质一级结构N末端，C末端，氨基酸残基(共价主链)，侧链。 蛋白质一级结构概念 蛋白质是由不同种类，数量和排列顺序的氨基酸，通过肽键相连而构成的高分子有机含氮化合物。蛋白质的一级结构是其作用的特异性，空间结构的差异性和生物学功能多样性的基础。 （二）、蛋白质一级结构测定 研究蛋白质的一级结构从确定组成蛋白质的单元结构—氨基酸算起，已有150年的悠久历史，直到1953年，Sanger首次阐明胰岛素的氨基酸排列顺序，为研究蛋白质的一级结构开辟了道路。这在分子生物学的发展进程中是一个重要突破。目前关于核酸的一级结构研究，由于Sanger等发明了加减法，得到了突飞猛进的发展。 为什么要进行蛋白质一级结构的测定（或者说确定组成蛋白质的氨基酸种类，数量，排列顺序）？有以下原因： 蛋白质一级结构的确定有助于阐明蛋白质一级结构与空间结构的关系。 蛋白质一级结构的确定有助于认识蛋白质一级结构与生物学功能的关系。 蛋白质一级结构的确定有助于揭示蛋白质一级结构的变化与疾病的关系。 蛋白质一级结构的确定有助于了解生物进化中蛋白质的作用。 蛋白质一级结构测定内容 蛋白质分子中氨基酸组成分析(amino acid composition analysis) 蛋白质分子中氨基酸排列顺序分析 蛋白质一级结构测定步骤(基本