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磷酸果糖激酶活性的测定 磷酸果糖激酶 （phosphofructokinase，orATP：D-fructose-6-phosphate 1-phos-pho-transferase，简 称PFK，EC2.7.1.11）广泛存在于生物界，不可逆地催化果糖-6-磷酸与ATP 反应生成果糖-1.6- 二磷酸和ADP。这个反应是糖酵解途径中一个重要的调节点。在植物细胞中，PFK 根据其分布 有胞质型和质体型之分，两者具有不同的调节特性，特别是对无机磷的反应上。但也有共同点， 如其活性均表现被ATP，PEP 和NADPH 抑制。此酶的聚合态常表现出多样性。 1 仪器设备 高速冷冻离心机、恒温水浴、紫外分光光度计等。 2 操作方法 2.1粗酶样品的制备：植物材料按 1：2～1：4 的比例（w/v）加提取缓冲液（含50mmol/L Tris-HCl， pH8.0；2mmol/LEDTA，14mmol/L 巯基乙醇，5mmol/LMgCl ，10%甘油，0.1mmol/LATP，0.5 2 mmol/LPMSF）和1% （w/v）不溶性PVP，在研钵中研匀，20000×g 离心10min，取上清 （1～ 2ml），在已用提取缓冲液平衡的Sephadex G-25柱 （1.6