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脲酶的提取和活性测定 脲酶属酰胺酶类，能催化水解脲，其反应式如下： 脲酶存在于多数植物、真菌和某些细菌中，尤以大豆和刀豆种子中含量最高，可达0.08%～ 0.15%。脲酶有严格的特异性，它只分解脲，而不损害其衍生物。脲酶作用的最适 pH 是决定于 脲的浓度与所用缓冲液的性质及浓度。 1.仪器设备 捣碎机、冰箱、高速离心机、分光光度计等。 2.操作方法 1）酶的制备 （1）粗提：将实验采用的刀豆或大豆种子捣碎，用石油醚或乙醚短时浸泡2～3 次以去油， 再捣碎 （或研磨）至细粉状态，再去油。去油的豆粉在空气中挥干溶剂，长久保存备用。 （2）纯化：将去了油的豆粉用5倍体积的水在低温下提取18~24h，用纱布压挤，挤出液离 心，取上清液真空浓缩至干，所得的干粉溶于水。水提液在搅拌下倒入4 倍于其体积的丙酮中， 用数倍无水丙酮处理沉淀若干次，最后干燥之。也可将制品溶于50倍其体积的水中，并通人CO2 气流，结果有羽毛状沉淀析出，过滤除去沉淀，向透明的滤液中加入一半体积的丙酮，如是反复 2～3 次，直至没有可见的浑浊现象为止，最后冷却至 10℃，向溶液中通入CO 至含有脲酶作用