甜菜碱含量的测定.pdfVIP

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  • 2023-03-08 发布于上海
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甜菜碱含量的测定 甜菜碱是一种分布很广的细胞相容性物质,藜科中的许多植物在盐渍、干旱胁迫下,胞内大 量积累甜菜碱。测定甜菜碱的方法有许多种,现代的核磁共振 (H-NMR)和质谱技术定量准确, 灵敏度高,但对仪器设备要求很高;经典的比色法由于反应专一性不高,对准确定量造成一定程 度影响。用现代分析技术分析表明,一些藜科植物中,往往只含有1~2 种菜碱类化合物,其中 甘氨酸甜菜碱的含量是其他甜菜碱类化合物的500~1000倍。化学色法测得藜科一类植物中的甘 氨酸甜菜碱含量与NMR 测得的结果并无显著差异。化学比色法的原理是碘可与四价铵类化合物 (QACs)反应,形成水不溶性的高碘酸盐类物质,此水不溶性物质可溶于二氯乙烷,在365nm 波长下具有最大的吸收值。甜菜碱类化合物与胆碱被碘沉淀所需的pH 范围不同。根据甘氨酸甜 菜碱含量等于四价铵化合物的量减去胆碱的量计算甜菜碱含量。 1.仪器设备 紫外分光光度计、离心机、Dowex1柱或Dowex1与Aberlite (1+2)混合柱、Dowex50柱。 2.操作方法 1)甜菜碱提取和纯化:以甲醇:氯仿:水 12:5:3 的比例配制甜菜碱提取液。1~2g材 料(例如菠菜叶片)加入 10ml 甜菜碱提取液后进行研磨。匀浆液在60~70℃水浴中保温 10min。 冷

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