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酰脲含量的测定 许多豆科植物如大豆根瘤菌固氮的最初输出产物主要是酰脲 （尿囊素和尿囊酸）。测定酰脲 含量可以作为乙炔还原活性的附加方法。尿囊素和尿囊酸可视为乙醛酸的衍生物，它们对酸和碱 有不同的敏感性。因此可通过酸和碱选择水解产生的乙醛酸，先在中性条件下与苯肼结合转化成 苯胺，再在苯肼和浓盐酸存在条件下被铁氰化钾氧化生成红色的1，5-二苯甲腊，然后根据其在 535nm 处光密度变化确定酰脲含量的多寡。 1.仪器设备 分光光度计、台式离心机。 2.操作方法 1）提取：取在65℃下烘干48h 后的植物材料，磨成粉后，取0.5g样品，加入 10ml 50%乙 醇的0.1mol/L 磷酸缓冲液 （pH7.0），置80℃水浴中萃取5min，以2000×g 离心15min，取上清 液置于具塞试管中，贮存在20℃下备用。 2）水解：取2ml 上述提取液与0.15mol/LHCI 混合后放到沸水浴 （100℃）中加热6min，冷 却后测定尿囊酸含量。另取1.5ml 上述提取液与0.5ml 0.5mol/LNaOH 混合，于100 ℃水浴中加 热7min，冷却后加入0.5ml 0.65mol/LHCI，此混合液再于100℃水浴中加热6min，冷却后测定 酰脲含量。 3）测定：向上述水解液 （2.5ml）